| α-半乳糖苷酶基因Mell在毕赤酵母中的组成型表达 |
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| 引用本文： | 张学文,唐香山,张金谌,章怀云. α-半乳糖苷酶基因Mell在毕赤酵母中的组成型表达[J]. 农业生物技术学报, 2006, 14(2): 269-272 |
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| 作者姓名： | 张学文 唐香山 张金谌 章怀云 |
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| 作者单位： | 1. 湖南农业大学生物科学技术学院,长沙,410128
2. 中南林业科技大学生命科学与技术学院,长沙,412006 |
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| 摘 要： | 用PCR方法从酵母（Saccharomyces cerevisiae）AH109中扩增出α-半乳糖苷酶的Mell基因,将其克隆至整合型载体pGAPZαA中构建成组成型分泌表达酶产物的重组质粒pGAPZα-Mell.将线性化的重组质粒pGAPZα-Mell电击转化至毕赤酵母（Pichia pastoris）KM71,在含有100 mg/mL zeocin和预先涂布有X-α-gal的YPDS平板上选择蓝色阳性菌落.发酵培养酵母的上清经SDS-PAGE分析,在53 kD处有特异带;经非变性PAGE凝胶电泳,与显色底物的反应,检测到α-半乳糖苷酶活性带.重组菌pGAPZα-Mell/KM71摇瓶发酵6 d后,培养液α-半乳糖苷酶粗酶活性为12 U/mL.
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| 关 键 词： | α-半乳糖苷酶 Mell基因,重组质粒pGAPZα-Mell 组成型表达 |
| 文章编号： | 1006-1304（2006）02-0269-04 |
| 收稿时间： | 2005-03-30 |
| 修稿时间： | 2005-12-28 |
Constitutive Expression of α-galactosidase Mell Gene in Pichia pastoris |
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| ZHANG Xue-wen,TANG Xiang-shan,ZHANG Jin-chen,ZHANG Huai-yun. Constitutive Expression of α-galactosidase Mell Gene in Pichia pastoris[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2006, 14(2): 269-272 |
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| Authors: | ZHANG Xue-wen TANG Xiang-shan ZHANG Jin-chen ZHANG Huai-yun |
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| Affiliation: | 1.College of Bio-science and Technology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China; 2. College of Life Science and Technology, Central-south Forestry University, Changsha 412006, China |
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