| BIBAC2载体转化水稻的研究 |
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| 引用本文： | 丁文静,叶兴国. BIBAC2载体转化水稻的研究[J]. 农业科学研究, 2006, 27(1): 6-9,12 |
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| 作者姓名： | 丁文静 叶兴国 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院,作物科学研究所,北京,100081;宁夏大学,农学院,银川,750021
2. 中国农业科学院,作物科学研究所,北京,100081 |
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| 摘 要： | 双元细菌人工染色体(BIBAC)载体具有克隆大片段DNA构建文库和农杆菌介导转化植物的双重功能.利用BIBAC载体,在双子叶植物烟草和番茄中已实现了大片段DNA的转移,但在单子叶植物中的应用还未见报道.本研究利用不同水稻基因型、不同农杆菌菌株,对水稻进行了BIBAC2载体的转化研究.水稻成熟胚诱导愈伤组织经过1~2次继代培养,在含乙酰丁香酮的N6培养基上预培养3 d,在含BIBAC2载体的农杆菌中侵染10 min,26℃下共培养3 d.感染后的愈伤组织在含25~50 mg/L潮霉素培养基上经过4~8周的筛选,共得到了66株抗性再生植株.通过对抗性植株中GUS基因的组织化学染色检测,NPTII基因的PCR检测和ELISA检测,HYG基因的PCR检测,确认2株阳性植株来自EHA105菌系侵染的中花15号愈伤组织,1株阳性植株来自EHA105菌系侵染的中花8号愈伤组织,转化率分别为2.9%和0.9%.结果表明,BIBAC2载体已被成功导入了水稻基因组中,转化效果EHA105菌株优于C58C1菌株,中花15号、中花8号优于中花10号和中花11号.结果还表明,利用三亲交配法可以将大于23.5 kb的载体转化到农杆菌中.初步建立了BIBAC2载体转化水稻的技术体系,为利用BIBAC系统向水稻转入大片段DNA和多个外源功能基因奠定了基础.
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| 关 键 词： | 水稻 双元细菌人工染色体 农杆菌 遗传转化 |
| 文章编号： | 1673-0747（2006）01-0006-04 |
| 收稿时间： | 2005-08-26 |
| 修稿时间： | 2005-08-26 |
Research of the transferring of BIBAC2 vector into rice mediated by Agrobacterium |
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| Ding Wenjing,Ye Xingguo. Research of the transferring of BIBAC2 vector into rice mediated by Agrobacterium[J]. Journal of Agricultural Sciences, 2006, 27(1): 6-9,12 |
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| Authors: | Ding Wenjing Ye Xingguo |
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| Affiliation: | 1. Institute of Crop Science, Chinese Academy of Agricultural Scienees, Beijing 100081, China; 2. School of Agriculture, Ningxia University, Yinehuan 750021, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | rice binary bacterial artificial chromosome(BIBAC) Agrobacterium tumefaciens genetic transformation |
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