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检测禽流感抗体的重组核蛋白间接ELISA方法的建立
引用本文:陈红英,崔沛,方忠意,李新生,崔保安.检测禽流感抗体的重组核蛋白间接ELISA方法的建立[J].江苏农业学报,2010,26(2).
作者姓名:陈红英  崔沛  方忠意  李新生  崔保安
作者单位:1. 河南农业大学牧医工程学院,河南,郑州,450002
2. 河南省畜牧局,河南,郑州,450002
基金项目:国家“十一五”科技支撑计划专项(2006BAD06A08)
摘    要:以大肠杆菌系统表达的H9亚型禽流感病毒(AIV)核蛋白(NP)为抗原包被ELISA板,通过反应条件的筛选,建立检测禽流感抗体的重组核蛋白间接ELISA(NP-ELISA)方法。结果表明,抗原最佳包被质量浓度为7.56μg/ml,血清最适稀释度为1∶160,作用时间为60 min;辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗鸡IgG最适稀释度为1∶5 000,血清和酶标抗体最适作用时间为60 min。特异性试验结果表明,NP抗原可与H5、H7和H9亚型AIV特异性抗体发生反应,经NP-ELISA检测为阳性的H9亚型AI血清样品能够被H9亚型AIV阻断,而NP抗原与新城疫等4种疫病阳性血清不发生反应。对223份待检鸡血清进行检测,NP-ELISA阳性检出率为96.86%(216/223),而血凝抑制试验、琼脂免疫扩散试验结果分别为93.72%(209/223)和81.61%(182/223),表明NP-ELISA是检测禽流感型特异性抗体的一种特异、敏感、快速、经济的血清学检测技术。

关 键 词:禽流感病毒  重组核蛋白  NP-ELISA  抗体检测  

Development of Indirect Enzyme-linked Immunosorbent Assay with Nucleoprotein for Detection of Antibody against Avian Influenza Virus
CHEN Hong-ying,CUI Pei,FANG Zhong-yi,LI Xin-sheng,CUI Bao-an.Development of Indirect Enzyme-linked Immunosorbent Assay with Nucleoprotein for Detection of Antibody against Avian Influenza Virus[J].Jiangsu Journal of Agricultural Sciences,2010,26(2).
Authors:CHEN Hong-ying  CUI Pei  FANG Zhong-yi  LI Xin-sheng  CUI Bao-an
Institution:1.College of Animal Husbandry and Veterinary/a>;Henan Agricultural University/a>;Zhengzhou 450002/a>;China/a>;2.Husbandry and Veterinary Bureau of Henan Province/a>;China
Abstract:
Keywords:avian influenza virus  recombinant nucleoprotein  NP-ELISA  antibody detection  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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