| 利用电转化法构建烟草野火病菌的Tn 5插入突变体 |
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| 引用本文： | 陈红,李江利,焦伟,蒋士君.利用电转化法构建烟草野火病菌的Tn 5插入突变体[J].河南农业大学学报,2010,44(3). |
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| 作者姓名： | 陈红 李江利 焦伟 蒋士君 |
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| 作者单位： | 河南农业大学植物保护学院,河南,郑州,450002 |
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| 基金项目： | 河南省科技攻关重点项目 |
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| 摘 要： | 采用电转化法将含有kanr基因标记的EZ::Tn 5转座子插入到烟草野火病菌(Pseudomonas syringae pv. tabaci)的基因组中.结果表明,在电压为2 400 V条件下,供试的烟草野火病菌菌株SMX 006及WT 4的电转化效率分别为0.8×103,4.2×103 cfu·μg-1 DNA.转化电压下降至1 800 V时,WT 4菌株的转化效率也随之下降至1.64×103 cfu·μg-1 DNA.对转化子进行kanr筛选以及特异性PCR鉴定,表明Tn 5可以稳定地插入到受体菌的基因组中.对烟草野火病菌SMX 006的Tn 5插入突变体进行了多次致病性﹑运动性和胞外蛋白酶活性测定,从中获得了2个致病力明显减弱的突变株(H 028,H 029)、1个运动能力明显减弱的突变株(H 028)、1个运动能力丧失的突变株(H 029)、1个产胞外蛋白酶能力明显减弱的突变株(H 046),以及1个胞外蛋白酶缺失的突变株(H 045).
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| 关 键 词： | 烟草野火病菌 电转化 Tn5插入突变 功能突变体 |
Construction of Tn 5 insertional mutants of Pseudomonas sringae pv. tabaci by electroporation |
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| CHEN Hong,LI Jiang-li,JIAO Wei,JIANG Shi-jun.Construction of Tn 5 insertional mutants of Pseudomonas sringae pv. tabaci by electroporation[J].Journal of Henan Agricultural University,2010,44(3). |
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| Authors: | CHEN Hong LI Jiang-li JIAO Wei JIANG Shi-jun |
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