| 家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin16的表达规律及体外重组表达 |
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| 引用本文： | 董照明,赵萍,王凌燕,李游山,张艳,夏庆友. 家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin16的表达规律及体外重组表达[J]. 蚕业科学, 2010, 36(2): 236-242. DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2010.02.006 |
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| 作者姓名： | 董照明 赵萍 王凌燕 李游山 张艳 夏庆友 |
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| 作者单位： | 西南大学蚕学与系统生物学研究所,农业部蚕桑功能基因组与生物技术重点开放实验室,重庆,400716;西南大学蚕学与系统生物学研究所,农业部蚕桑功能基因组与生物技术重点开放实验室,重庆,400716;西南大学蚕学与系统生物学研究所,农业部蚕桑功能基因组与生物技术重点开放实验室,重庆,400716;西南大学蚕学与系统生物学研究所,农业部蚕桑功能基因组与生物技术重点开放实验室,重庆,400716;西南大学蚕学与系统生物学研究所,农业部蚕桑功能基因组与生物技术重点开放实验室,重庆,400716;西南大学蚕学与系统生物学研究所,农业部蚕桑功能基因组与生物技术重点开放实验室,重庆,400716 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，国家重点基础研究发展计划"973"项目，国家教育部"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目 |
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| 摘 要： | 家蚕(Bombyxmori)的丝腺是丝蛋白合成分泌的场所,存在多种丝氨酸蛋白酶抑制剂。为探究家蚕丝蛋白的合成和保护机制,采用半定量RT-PCR的方法调查家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin16在家蚕不同发育时期和5龄第5天幼虫各个组织器官中的表达特征,结果表明家蚕serpin16基因仅在4眠-5龄第6天的发育期表达,并且仅在丝腺中特异表达,其中在中部丝腺前区转录水平最高,而在中部丝腺中区和后区的转录水平较低;进一步构建pGEX-4T-1-serpin16原核表达载体,并转化至大肠杆菌(Eschevichia coli)BL21(DE3),经IPTG诱导获得融合蛋白,纯化后得到单一的目的蛋白。家蚕serpin16基因在幼虫丝腺的特异表达模式提示其可能与家蚕的吐丝过程密切相关,推测该基因在维持丝腺稳定的泌丝环境中发挥重要作用。
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| 关 键 词： | 家蚕 丝腺 丝氨酸蛋白酶抑制剂 半定量RT-PCR 原核表达 |
Expression Pattern,in vitro Recombination and Expression of Bombyx mori Serine Protease Inhibitor Gene serpin16 |
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| DONG Zhao-Ming,ZHAO Ping,WANG Ling-Yan,LI You-Shan,ZHANG Yan,XIA Qing-You. Expression Pattern,in vitro Recombination and Expression of Bombyx mori Serine Protease Inhibitor Gene serpin16[J]. Acta Sericologica Sinica, 2010, 36(2): 236-242. DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2010.02.006 |
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| Authors: | DONG Zhao-Ming ZHAO Ping WANG Ling-Yan LI You-Shan ZHANG Yan XIA Qing-You |
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| Affiliation: | DONG Zhao-Ming ZHAO Ping WANG Ling-Yan LI You-Shan ZHANG Yan XIA Qing-You(Institute of Sericulture , Systems Biology,Southwest University,The Key Laboratory for Sericulture Functional Genomics , Biotechnology of Agricultural Ministry,Chongqing 400716,China) |
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| Abstract: | Fibroin and sericin are synthesized in silk gland of the silkworm(Bombyx mori)where various serine protease inhibitors reside.In order to understand mechanism of silk protein synthesis and protection in silkworm,semi-quantitative RT-PCR was employed to investigate the expression patterns of silkworm serine protease inhibitor gene serpin16 at different developmental stages and in various tissues/organs of the 5th day larvae of the 5th instar.The results showed that serpin16 was specifically expressed in silk... |
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| Keywords: | Bombyx mori Silk gland Serpin Semi-quantitative RT-PCR Prokaryotic expression |
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