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坏死梭杆菌白细胞毒素基因的BSBSE片段的原核表达及抗血清制备
引用本文:张秀华,陈立志,赵利芳,刘晓颖,路伟. 坏死梭杆菌白细胞毒素基因的BSBSE片段的原核表达及抗血清制备[J]. 中国预防兽医学报, 2008, 30(11)
作者姓名:张秀华  陈立志  赵利芳  刘晓颖  路伟
作者单位:中国农业科学院,特产研究所,吉林,左家,132109
基金项目:吉林市科技发展计划项目 , 国家科技攻关项目  
摘    要:本研究以国内分离的牛源坏死梭杆菌F4基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增BSBSE片段,克隆到pMD18-T载体上,鉴定并测序正确后,构建pET32a-BSBSE表达质粒,转化E.coli BL21(DE3)经IPTG诱导、SDS—PAGE检测重组蛋白表达、Western blot检测重组蛋白反应原性。以该重组蛋白免疫兔制备抗血清,经间接ELISA检测抗血清效价。结果表明,PCR扩增得到1100bp的BSBSE片段,以此片段构建了pET32a—BSBSE表达质粒,经诱导后获得了目的蛋白表达,以Western blot检测该重组蛋白证明为本研究的目的蛋白,并且与抗体具有反应原性。以间接ELISA检测该重组蛋白免疫兔制备的抗血清效价达10^5。研究结果将为坏死梭杆菌毒力因子(1kt)的深入研究奠定了物质基础。

关 键 词:坏死梭杆菌  表达

Expression of leukotoxin BSBSE gene of Fusobacterium necrophorum
ZHANG Xiu-hua,CHEN Li-zhi,ZHAO Li-fang,LIU Xiao-ying,LU Wei. Expression of leukotoxin BSBSE gene of Fusobacterium necrophorum[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2008, 30(11)
Authors:ZHANG Xiu-hua  CHEN Li-zhi  ZHAO Li-fang  LIU Xiao-ying  LU Wei
Abstract:
Keywords:1kt  BSBSE
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