| 牛病毒性腹泻病毒陕西株的分离与NS5b基因序列测定 |
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| 引用本文： | 马秋明,王学艳,王晶钰.牛病毒性腹泻病毒陕西株的分离与NS5b基因序列测定[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2008,36(12):1-6. |
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| 作者姓名： | 马秋明 王学艳 王晶钰 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学动物医学院 |
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| 基金项目： | 陕西省科技攻关计划
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国家科技支撑计划奶业专项基金
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| 摘 要： | 【目的】分离并鉴定陕西省牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)。【方法】采集腹泻犊牛的肠系膜淋巴结,处理后接种于MDBK细胞,盲传,逐日观察是否有细胞病变产生。采用病毒蚀斑技术对病毒克隆纯化后,提取其RNA,进行RT-PCR鉴定。将扩增的NS5b基因克隆入pMD18-T载体中,采用碱裂解法小量提取质粒,并对质粒进行EcoRⅠ和SalⅠ双酶切、SalⅠ单酶切及PCR鉴定,对阳性克隆进行核苷酸序列测定及分析。采用病毒蚀斑试验测定分离毒株的半数组织培养感染量(TCID50)。【结果】盲传4代后细胞出现典型、规律的细胞病变。RT-PCR扩增出预期长度(360 bp)的基因片段,核苷酸序列分析结果表明,所扩增的基因为牛病毒性腹泻黏膜病病毒NS5b基因,其与BVDV VEDEVAC株NS5b基因核苷酸序列有99%同源性。BVDV陕西株的半数组织培养感染量(TCID50)为3.6。【结论】成功分离了牛病毒性腹泻病毒陕西株,为陕西省BVDV的防治提供了理论依据。
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| 关 键 词： | 牛病毒性腹泻病毒 NS5b基因 RT-PCR 细胞病变 陕西省 |
| 收稿时间： | 2007/10/28 0:00:00 |
Isolation and NS5b gene sequencing of BVDV in Shaanxi Province |
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| MA Qiu-ming,WANG Xue-yan,WANG Jing-yu,HE Wei-ming.Isolation and NS5b gene sequencing of BVDV in Shaanxi Province[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2008,36(12):1-6. |
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| Authors: | MA Qiu-ming WANG Xue-yan WANG Jing-yu HE Wei-ming |
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| Institution: | (College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RT-PCR |
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