| NFκB1在奶牛乳腺上皮细胞中的表达与定位 |
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| 引用本文： | 臧艳丽,古新宇,黄鑫,于翠平,骆超超,高学军.NFκB1在奶牛乳腺上皮细胞中的表达与定位[J].中国畜牧兽医,2016,43(8):2112-2119. |
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| 作者姓名： | 臧艳丽 古新宇 黄鑫 于翠平 骆超超 高学军 |
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| 作者单位： | 东北农业大学, 黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室, 哈尔滨 150030 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划（863计划）项目（2013AA102504-03） |
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| 摘 要： | 试验旨在研究奶牛乳腺上皮细胞（bovine mammary epithelial cell, BMEC）中NFκB1的表达与定位变化，以阐明NFκB1对BMEC乳合成的转录调节机理。通过组织块法培养原代细胞，利用BMEC和成纤维细胞对胰蛋白酶敏感性的不同进行纯化和传代；利用Western blotting和免疫荧光染色法检测细胞中角蛋白18和β-酪蛋白的表达以鉴定细胞的纯度和泌乳功能；通过添加0.6 mmol/L蛋氨酸建立氨基酸刺激BMEC泌乳的体外模型；Western blotting和免疫荧光法检测添加蛋氨酸后NFκB1和p-NFκB1表达与定位的变化。结果显示，获得了纯化的BMEC；Western blotting检测发现NFκB1在细胞浆中存在约141和105 ku两种形式，在细胞核中只存在105 ku形式；p-NFκB1（50 ku）主要存在于细胞核内。在添加蛋氨酸后NFκB1的141 ku形式的含量有一定增加；105 ku形式在细胞浆内蛋白水平变化不明显，在细胞核内水平明显升高；p-NFκB1在细胞核中的定位明显增加。结果提示，NFκB1参与BMEC乳合成的转录调节，氨基酸通过促进细胞核内NFκB1磷酸化以调节泌乳相关基因的转录和促进乳合成。
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| 关 键 词： | NF&kappa B1 p-NF&kappa B1 奶牛乳腺上皮细胞 蛋氨酸 乳合成 |
| 收稿时间： | 2016-02-22 |
Expression and Localization of NFκB1 in Bovine Mammary Epithelial Cell |
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| ZANG Yan-li,GU Xin-yu,HUANG Xin,YU Cui-ping,LUO Chao-chao,GAO Xue-jun.Expression and Localization of NFκB1 in Bovine Mammary Epithelial Cell[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2016,43(8):2112-2119. |
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| Authors: | ZANG Yan-li GU Xin-yu HUANG Xin YU Cui-ping LUO Chao-chao GAO Xue-jun |
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| Institution: | Agricultural Biological Functional Gene Laboratory of Heilongjiang Province, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | NFκB1 p-NFκB1 BMEC methionine lactogenesis |
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