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NFκB1在奶牛乳腺上皮细胞中的表达与定位
引用本文:臧艳丽,古新宇,黄鑫,于翠平,骆超超,高学军.NFκB1在奶牛乳腺上皮细胞中的表达与定位[J].中国畜牧兽医,2016,43(8):2112-2119.
作者姓名:臧艳丽  古新宇  黄鑫  于翠平  骆超超  高学军
作者单位:东北农业大学, 黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室, 哈尔滨 150030
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2013AA102504-03)
摘    要:试验旨在研究奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cell, BMEC)中NFκB1的表达与定位变化,以阐明NFκB1对BMEC乳合成的转录调节机理。通过组织块法培养原代细胞,利用BMEC和成纤维细胞对胰蛋白酶敏感性的不同进行纯化和传代;利用Western blotting和免疫荧光染色法检测细胞中角蛋白18和β-酪蛋白的表达以鉴定细胞的纯度和泌乳功能;通过添加0.6 mmol/L蛋氨酸建立氨基酸刺激BMEC泌乳的体外模型;Western blotting和免疫荧光法检测添加蛋氨酸后NFκB1和p-NFκB1表达与定位的变化。结果显示,获得了纯化的BMEC;Western blotting检测发现NFκB1在细胞浆中存在约141和105 ku两种形式,在细胞核中只存在105 ku形式;p-NFκB1(50 ku)主要存在于细胞核内。在添加蛋氨酸后NFκB1的141 ku形式的含量有一定增加;105 ku形式在细胞浆内蛋白水平变化不明显,在细胞核内水平明显升高;p-NFκB1在细胞核中的定位明显增加。结果提示,NFκB1参与BMEC乳合成的转录调节,氨基酸通过促进细胞核内NFκB1磷酸化以调节泌乳相关基因的转录和促进乳合成。

关 键 词:NF&kappa  B1  p-NF&kappa  B1  奶牛乳腺上皮细胞  蛋氨酸  乳合成  
收稿时间:2016-02-22

Expression and Localization of NFκB1 in Bovine Mammary Epithelial Cell
ZANG Yan-li,GU Xin-yu,HUANG Xin,YU Cui-ping,LUO Chao-chao,GAO Xue-jun.Expression and Localization of NFκB1 in Bovine Mammary Epithelial Cell[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2016,43(8):2112-2119.
Authors:ZANG Yan-li  GU Xin-yu  HUANG Xin  YU Cui-ping  LUO Chao-chao  GAO Xue-jun
Institution:Agricultural Biological Functional Gene Laboratory of Heilongjiang Province, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China
Abstract:
Keywords:NFκB1  p-NFκB1  BMEC  methionine  lactogenesis  
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