奶牛溶菌酶基因的构建、表达及活性研究

为在体外获得奶牛溶菌酶(lysozyme,LYZ),人工设计并合成LYZ基因CDS序列,将其克隆至表达载体pET32T并转化大肠杆菌TOP10,筛选阳性菌株,经IPTG诱导,初步纯化表达产物,并对其进行SDS-PAGE分析。结果表明,重组质粒经PCR、双酶切及测序鉴定结果正确,表达产物经SDS-PAGE检测,分子量约为33kd,与目标蛋白质一致,且主要以包涵体的形式存在。用比浊法测得的溶菌酶活力为2 139U/mL。研究结果成功构建原核表达载体LYZ-pET32T并表达得到奶牛溶菌酶蛋白,为后续研究与应用奠定了基础。