| 狂犬病病毒糖蛋白单、双拷贝基因重组腺病毒穿梭载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 谭业平,祝艳蕾,孙招金,郭霄峰.狂犬病病毒糖蛋白单、双拷贝基因重组腺病毒穿梭载体的构建及表达[J].中国兽医学报,2010,30(6). |
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| 作者姓名： | 谭业平 祝艳蕾 孙招金 郭霄峰 |
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| 作者单位： | 华南农业大学,兽医学院,广东广州,510642 |
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| 基金项目： | 农业部公益性行业科研专项，广东省动物防疫检疫研究专项 |
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| 摘 要： | 提取HEP-Flury株狂犬病病毒RNA,RT-PCR方法扩增糖蛋白G基因,并克隆入pMD18-T载体,进行测序鉴定和序列分析。之后双酶切下G基因,将其亚克隆入腺病毒穿梭载体pShuttle-IRES-hrGFP-1,经卡那霉素抗性、PCR、双酶切及测序鉴定,获得重组单G腺病毒穿梭载体pShuttle-G。应用PCR方法在G基因末端引入口蹄疫病毒2A自剪切肽序列,并克隆入T载体,同时构建含G基因的T载体,分别双酶切回收以上2片段并将他们定向亚克隆入pShuttle-IRES-hrGFP-1,经系列鉴定,成功构建由2A自剪切肽序列连接双G基因的重组腺病毒穿梭载体pShuttle-dG。转染以上2个表达质粒入Ad-293细胞,荧光显微镜观察到GFP的表达,斑点印迹试验结果显示G蛋白成功表达。
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| 关 键 词： | 狂犬病病毒 糖蛋白基因 腺病毒穿梭载体 |
Construction of recombinant adenoviral shuttle vectors carrying the rabies virus single G and double G genes |
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| TAN Ye-ping,ZHU Yan-lei,SUN Zhao-jin,GUO Xiao-feng.Construction of recombinant adenoviral shuttle vectors carrying the rabies virus single G and double G genes[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2010,30(6). |
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| Authors: | TAN Ye-ping ZHU Yan-lei SUN Zhao-jin GUO Xiao-feng |
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