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巨型艾美球虫配子体gam82基因的克隆表达与免疫原性分析
引用本文:彭昊,陶建平,许金俊,刘丹丹,李建梅,任春芝. 巨型艾美球虫配子体gam82基因的克隆表达与免疫原性分析[J]. 中国兽医学报, 2010, 30(9)
作者姓名:彭昊  陶建平  许金俊  刘丹丹  李建梅  任春芝
作者单位:扬州大学兽医学院,江苏,扬州,225009
基金项目:江苏省自然科学基金资助项目
摘    要:提取巨型艾美球虫(Eimeria maxima)南通株(NT株)配子体总RNA,应用RT-PCR技术对gam82基因进行克隆,并对其核苷酸及氨基酸进行序列分析.结果表明,克隆的基因全长为1 791个核苷酸,具有一个完整的开放阅读框,编码596个氨基酸,与GenBank中发表的Houghton株gam82基因同源性为100%.根据对推导的氨基酸序列的二级结构和抗原表位分析的结果,筛选免疫原性良好的区域,命名为gam82-Y,进行原核表达.重组菌经过IPTG诱导后,通过SDS-PAGE电泳和Western-blot检测,gam82-Y基因片段在大肠杆菌中得到了融合表达,相对分子质量约为53 000.可溶性分析表明,融合蛋白主要以包涵体形式存在.以 E.maxima高免血清为一抗进行Western-blot检测,显示重组抗原gam82-Y具有免疫原性.

关 键 词:巨型艾美球虫  gam82基因  克隆  序列分析  表达

Cloning and prokaryotic expression of gam82 of Eimeria maxima NT strain and immunogenicity analysis of the recombinant protein
PENG Hao,TAO Jian-ping,XU Jin-jun,LIU Dan-dan,LI Jian-mei,REN Chun-zhi. Cloning and prokaryotic expression of gam82 of Eimeria maxima NT strain and immunogenicity analysis of the recombinant protein[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2010, 30(9)
Authors:PENG Hao  TAO Jian-ping  XU Jin-jun  LIU Dan-dan  LI Jian-mei  REN Chun-zhi
Abstract:
Keywords:
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