| 非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 曾少灵,花群义,杨俊兴,张彩虹,孙洁,阮周曦,吕建强,曹琛福,秦智锋,陈兵,陈书琨,杨云庆. 非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法的建立[J]. 中国兽医学报, 2010, 30(9) |
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| 作者姓名： | 曾少灵 花群义 杨俊兴 张彩虹 孙洁 阮周曦 吕建强 曹琛福 秦智锋 陈兵 陈书琨 杨云庆 |
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| 作者单位： | 1. 深圳出入境检验检疫局,动植中心,广东,深圳,518010
2. 云南出入境检验检疫局,技术中心,云南,昆明,650228 |
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| 基金项目： | 国家质检总局科研项目，国家863课题 |
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| 摘 要： | 依据非洲猪瘟病毒(ASFV)的vp73基因保守序列,设计了特异性引物与TaqMan探针,扩增片段69bp,建立了ASFV实时荧光PCR检测方法。与OIE推荐用于检测ASFV的实时荧光PCR和普通PCR方法进行比对,结果显示,本文建立的方法与OIE两种检测方法的特异性相当,灵敏度与OIE荧光PCR方法相当,但比普通PCR方法高出至少10倍。标准定量曲线显示,本文方法最低检测限可达10 copies/μL病毒DNA(相关系数为0.993046)。重复性试验的批内CV值为0.61%～1.14%,批间CV值为1.37%～3.14%,表明本文方法的重复性和稳定性良好。可见,本文建立的基于vp73基因的ASFV实时荧光PCR检测方法具备快速、准确、灵敏的特点,将为检验检疫部门防御ASFV传入我国提供更多技术支持。
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| 关 键 词： | 非洲猪瘟病毒 实时荧光PCR 检测 |
Development of fluorescent Real-time PCR method for detection of ASFV |
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| ZENG Shao-ling,HUA Qun-yi,YANG Jun-xing,ZHANG Cai-hong,SUN Jie,RUAN Zhou-xi,LU Jian-qiang,CAO Chen-fu,QIN Zhi-feng,CHEN Bing,CHEN Shu-kun,YANG Yun-qing. Development of fluorescent Real-time PCR method for detection of ASFV[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2010, 30(9) |
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| Authors: | ZENG Shao-ling HUA Qun-yi YANG Jun-xing ZHANG Cai-hong SUN Jie RUAN Zhou-xi LU Jian-qiang CAO Chen-fu QIN Zhi-feng CHEN Bing CHEN Shu-kun YANG Yun-qing |
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