| 应用巢式PCR检测隐孢子虫 |
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| 引用本文： | 李巍,吴康,张西臣,李建华,张国才,李淑红,宫鹏涛,杨举. 应用巢式PCR检测隐孢子虫[J]. 中国兽医学报, 2010, 30(6) |
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| 作者姓名： | 李巍 吴康 张西臣 李建华 张国才 李淑红 宫鹏涛 杨举 |
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| 作者单位： | 1. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林长春,130062
2. 吉林大学,白求恩医学院,吉林长春,130021 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划资助项目 |
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| 摘 要： | 应用巢式聚合酶链反应(Nested PCR)建立了一种检测隐孢子虫(Cryptosporidium)的方法。试验中隐孢子虫卵囊纯化采用庶糖密度梯度离心法,以液氮-热水浴反复冻融及酚-氯仿抽提冷乙醇沉淀法制备模板DNA,根据隐孢子虫18S rRNA序列高度保守区设计2对引物,建立Nested PCR诊断方法。该方法特异性强,可检出牛源微小隐孢子虫(C.parvum)、羊源微小隐孢子虫(C.parvum)、牛源安氏隐孢子虫(C.andersoni)、鸡源贝氏隐孢子虫(C.baileyi)及猪源隐孢子虫(C.suis);敏感性高,该方法最低核酸DNA检测量达到10fg。初步应用结果表明,所建立的Nested PCR方法适合于隐孢子虫病的诊断和分子流行病学调查。
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| 关 键 词： | 隐孢子虫 Nested PCR 检测 |
Detection of Cryptosporidium by Nested PCR assay |
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| LI Wei,WU Kang,ZHANG Xi-chen,LI Jian-hua,ZHANG Guo-cai,LI Shu-hong,GONG Peng-tao,YANG Ju. Detection of Cryptosporidium by Nested PCR assay[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2010, 30(6) |
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| Authors: | LI Wei WU Kang ZHANG Xi-chen LI Jian-hua ZHANG Guo-cai LI Shu-hong GONG Peng-tao YANG Ju |
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