GsCRCK 基因转化农菁１号苜蓿及其耐盐性分析

 GsCRCK 基因是参与胁迫早期应答的钙／钙调素调控的受体类蛋白激酶基因，研究发现GsCRCK  正向调控拟南芥对ＮａＣｌ和ＡＢＡ 胁迫的耐性，将耐盐蛋白激酶基因犌狊犆犚犆犓转化苜蓿，对于增强苜蓿的耐盐性具有重要的现实意义。本研究采用农杆菌介导法将其转入农菁１号苜蓿，获得大量抗性植株。经ＰＣＲ 和ＲＴ－ＰＣＲ 检测证明GsCRCK  基因已整合到农菁１号苜蓿基因组中并在转基因植株中转录表达。对获得的２ 个转基因株系进行耐盐性分析，在３００ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ条件下进行胁迫处理，测定处理０，３，６，９，１２，１５ｄ后的质膜透性、丙二醛（ＭＤＡ）和叶绿素（Ｃｈｌ）含量，以及胁迫１５ｄ时的ＳＯＤ 活性；并统计４００ ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ处理１５ｄ时各株系的死亡率。结果显示，３００ｍｍｏｌ／Ｌ 高盐胁迫１５ｄ后转基因苜蓿仍能正常生长，而野生型苜蓿则遭受盐害严重；转基因苜蓿的相对电导率极显著低于野生型，ＭＤＡ 含量也显著低于野生型，而Ｃｈｌ含量和ＳＯＤ 活性都显著高于野生型；在４００ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ处理下，２个转基因株系的死亡率分别为１３．３３％和１０．００％，明显低于野生型植株（６３．３３％）。表明GsCRCK 基因的导入提高了转基因苜蓿的耐盐性。

Transformation of the GsCRCK gene into Medicago sativa cv. Nongjing No.1 and salt tolerance analysis in transgenic plants