| 鸭维甲酸诱导基因I克隆及其结构域功能分析 |
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| 引用本文： | 陈阳,黄正洋,张扬,李欣钰,甄霆,吴宁昭,徐琪,陈国宏. 鸭维甲酸诱导基因I克隆及其结构域功能分析[J]. 中国农业科学, 2013, 46(10): 2094-2102. DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.10.015 |
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| 作者姓名： | 陈阳 黄正洋 张扬 李欣钰 甄霆 吴宁昭 徐琪 陈国宏 |
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| 作者单位： | 1. 扬州大学动物科学与技术学院,江苏扬州,225009
2. 江西农业大学动物科学技术学院,南昌,330045 |
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| 基金项目： | 现代农业产业技术体系建设专项（CARS-43-3）、江苏高校优势学科建设工程资助项目（苏政办发[2011]137号） |
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| 摘 要： | 【目的】克隆鸭维甲酸诱导基因I（retinoic acid inducible gene I，RIG-I），分析其不同结构域的功能。【方法】根据GenBank上公布的鸭RIG-I序列设计引物，利用RT-PCR克隆鸭RIG-I基因CDS（coding sequence）区，根据保守结构域预测结果，构建携带6*his组氨酸标签的不同结构域缺失突变体的真核表载体（RIG-I-Full、RIG-I-N和RIG-I-C），转染鸡胚成纤维细胞DF1，经RT-PCR、间接免疫荧光方法鉴定重组质粒在细胞中转录与表达；同时，利用RT-qPCR检测RLR抗病毒信号通路中的IFN-β、Mx1和PKR等下游基因的表达变化。【结果】鸭RIG-I基因CDS区全长2 802 bp，共编码933个氨基酸；不同结构域缺失突变体的真核表载体转染DF1细胞后，重组蛋白均在DF1细胞中表达；RT-qPCR结果显示，N端能显著激活RLR通路上IFN-β、Mx1及PKR基因的表达上调。【结论】 duRIG-I及不同区段均能在DF1细胞中表达，其中N端在调节RLR抗病毒信号通路下游基因的表达过程中发挥了重要作用。
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| 关 键 词： | 鸭 RIG-I基因 克隆 RLR通路 |
| 收稿时间： | 2012-09-28 |
Molecular Cloning and Preliminary Functional Analysis of Domains of Duck Retinoic Acid Inducible Gene I |
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| CHEN Yang,HUANG Zheng-Yang,ZHANG Yang,LI Xin-Yu,ZHEN Ting,WU Ning-Zhao,XU Qi,CHEN Guo-Hong. Molecular Cloning and Preliminary Functional Analysis of Domains of Duck Retinoic Acid Inducible Gene I[J]. Scientia Agricultura Sinica, 2013, 46(10): 2094-2102. DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.10.015 |
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| Authors: | CHEN Yang HUANG Zheng-Yang ZHANG Yang LI Xin-Yu ZHEN Ting WU Ning-Zhao XU Qi CHEN Guo-Hong |
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| Affiliation: | 1.College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu;2.College of Animal Science and Technology, Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | duck RIG-I gene cloning RLR signal pathway |
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