中华蜜蜂化学感受蛋白基因家族克隆及表达特征分析

【目的】完成中华蜜蜂（Apis cerana cerana）化学感受蛋白（chemosensory proteins，CSPs）基因家族的序列及表达谱鉴定，解析中蜂整个CSPs家族的表达特征与分布规律，为中蜂CSPs的生物学功能研究提供参考。【方法】利用RT-PCR技术扩增，克隆获得中蜂CSPs基因家族全部6条基因序列的开放阅读框（ORF）全长，并利用real-time PCR技术对中蜂所有的CSPs序列在中蜂工蜂不同发育历期及不同器官表达特征进行研究。【结果】新克隆4条基因（Ac-CSP2、Ac-CSP4、Ac-CSP5和Ac-CSP6）的开放阅读框分别为354、387、315和378 bp，分别编码117、128、104和125个氨基酸残基，预测蛋白质分子量分别为13.01、14.61、12.46和14.63 kD，等电点分别为8.86、4.53、9.60和8.71，且均具有4个保守的半胱氨酸残基，均符合昆虫CSPs的一般生化特征。中蜂与意蜂CSPs同源基因家族间具有高达95%—99%的相似性。CSPs在中蜂不同发育时期及器官的表达特征结果显示，Ac-CSP1、2、3、4在卵、幼虫和蛹期几乎不表达，其中Ac-CSP1、2、4在触角中表达量最高，而Ac-CSP3在翅中表达量最高；Ac-CSP5在中蜂各个发育历期的表达量几乎相同；Ac-CSP6蛹期有较高表达，其余时期不表达。【结论】中蜂CSPs基因家族所有6个基因的氨基酸序列与意大利蜜蜂有较高的相似性，但二者各基因的表达谱在整体相似的情况下局部又存在着某些差异，为进一步研究该家族蛋白的生理功能机制奠定了良好基础。

Molecular Cloning and Expression Profiles Analysis of Chemosensory Protein Genes Family in the Chinese Honeybee (Apis cerana cerana)