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龙眼14-3-3基因及其启动子的克隆以及在体胚发生过程中的表达分析
引用本文:蔡英卿,赖钟雄,陈义挺,林玉玲,张妙霞,李惠华. 龙眼14-3-3基因及其启动子的克隆以及在体胚发生过程中的表达分析[J]. 热带作物学报, 2011, 32(5): 845-853. DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2011.05.013
作者姓名:蔡英卿  赖钟雄  陈义挺  林玉玲  张妙霞  李惠华
作者单位:1. 福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建福州350002;福建省泉州师范学院,福建泉州362000
2. 福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建福州,350002
基金项目:福建省重大科技平台建设(2008N2001),国家自然科学基金(31011787/30471204)项目。
摘    要:分离克隆龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈伤组织14-3-3基因,并分析该基因在龙眼体胚发生过程中的表达情况。采用RT-PCR结合RACE法,获得龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因的cDNA全长序列和DNA序列,采用TAIL-PCR法,获得龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因的启动子DNA序列,运用生物信息学方法对序列进行分析,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)研究该基因在龙眼体胚发生过程中的表达。结果表明:经克隆得到龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因786 bp的cDNA全长序列(GenBank检索号为GU573765),该cDNA开放阅读框推定的氨基酸序列(含261个氨基酸)与其它植物14-3-3具有较高同源性;该基因的DNA序列(GenBank检索号为GU573766)长为1 859 bp,包含3个内含子,内含子的剪切位点均符合真核生物"GT-AG"规则;该基因的启动子DNA序列(GenBank检索号为GU573766)长为910 bp;该基因在龙眼体胚各阶段均有表达,其中在松散型胚性愈伤组织阶段和心形胚及鱼雷形胚阶段呈现高表达,整个变化趋势呈"倒S"状。

关 键 词:龙眼胚性愈伤组织  14-3-3基因  克隆  序列分析  实时荧光定量PCR法

Cloning and Analysis of 14-3-3 Gene and Its Promotor and Its Expression during Longan(Dimocarpus longan Lour.)Somatic Embryogenesis
CAI Yingqing,LAI Zhongxiong,CHEN Yiting,LIN Yuling,ZHANG Miaoxia and LI Huihua. Cloning and Analysis of 14-3-3 Gene and Its Promotor and Its Expression during Longan(Dimocarpus longan Lour.)Somatic Embryogenesis[J]. Chinese Journal of Tropical Crops, 2011, 32(5): 845-853. DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2011.05.013
Authors:CAI Yingqing  LAI Zhongxiong  CHEN Yiting  LIN Yuling  ZHANG Miaoxia  LI Huihua
Affiliation:1 Institute of Horticultural Biotechnology,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou,Fujian 350002,China 2 Fujian Quanzhou Nornal University,Quanzhou,Fujian 362000,China
Abstract:
Keywords:
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