| 拟南芥Alpha-dioxygenase 1的原核表达、纯化及活性的检测 |
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| 引用本文： | 张小梅,韩念法,张美祥,李广录,范三红,郭蔼光. 拟南芥Alpha-dioxygenase 1的原核表达、纯化及活性的检测[J]. 华北农学报, 2008, 23(3) |
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| 作者姓名： | 张小梅 韩念法 张美祥 李广录 范三红 郭蔼光 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100;河南科技大学,农学院,河南,洛阳,471003;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100;河南科技大学,农学院,河南,洛阳,471003;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100;陕西省农业分子生物学重点实验室,陕西,杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 , 西北农林科技大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 从经水杨酸处理的拟南芥开花期植株中获得cDNA,扩增得到Alpha-dioxygenase 1(DOX1)基因,进行原核表达、纯化和生物活性检测。利用原核表达载体pMAL-c4x在T7 Express CompetentE.coli和BL21(DE3)-RIPL codon 菌株中表达DOX1,经Amylose Resin亲和层析柱纯化。SDS-PAGE结果表明,重组融合蛋白在BL21(DE3)-RIPL codon 中的表达通过灰度值比较分析以可溶性为主,表达率约3.7%,纯化的DOX1纯度可达45%。愈创木酚法表明,可溶性重组蛋白不具有过氧化物酶活性;2,4-DNP法测试表明可溶性重组蛋白具有脂肪酸双加氧酶活性。
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| 关 键 词： | Alpha-dioxygenase 1 重组表达 2 4-DNP 亲和纯化 活性 |
Expression, Purification and Activity Analysis of Arabidopsis-dioxygenase 1 |
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| ZHANG Xiao-mei,HAN Nian-fa,ZHANG Mei-xiang,LI Guang-lu,FAN San-hong,GUO Ai-guang. Expression, Purification and Activity Analysis of Arabidopsis-dioxygenase 1[J]. Acta Agriculturae Boreali-Sinica, 2008, 23(3) |
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| Authors: | ZHANG Xiao-mei HAN Nian-fa ZHANG Mei-xiang LI Guang-lu FAN San-hong GUO Ai-guang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Alpha-dioxygenase 1 Recombinant expression 2 4-DNP Affinity purification Activity |
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