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PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪的构建
引用本文:段新平,高飞,武蓉,宋奇,韩杨,姚潮刚,纪元. PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪的构建[J]. 安徽农业科学, 2012, 40(9): 5231-5233
作者姓名:段新平  高飞  武蓉  宋奇  韩杨  姚潮刚  纪元
作者单位:吉林大学畜牧兽医学院,动物胚胎工程吉林省重点实验室,吉林长春130062;吉林大学畜牧兽医学院,动物胚胎工程吉林省重点实验室,吉林长春130062;吉林大学畜牧兽医学院,动物胚胎工程吉林省重点实验室,吉林长春130062;吉林大学畜牧兽医学院,动物胚胎工程吉林省重点实验室,吉林长春130062;吉林大学畜牧兽医学院,动物胚胎工程吉林省重点实验室,吉林长春130062;吉林大学畜牧兽医学院,动物胚胎工程吉林省重点实验室,吉林长春130062;吉林大学畜牧兽医学院,动物胚胎工程吉林省重点实验室,吉林长春130062
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)资助(2011CB944203)
摘    要:[目的]建立PIWIL1基因启动子调控的特异性表达Cre重组酶的转基因猪,为研究piRNA及其相关基因的功能和机制奠定基础。[方法]通过PCR扩增,从猪的全基因组上扩增出PIWIL1基因的启动子。切除猪源Cre重组酶的表达载体pET28a-MHC-Cre-BGHpo1yA-FRT2neor的启动子MHC,将其与PIWIL1基因启动子连接,构建成特异性表达Cre重组酶的pPIWIL1-Cre载体。将该载体转染小型猪胎儿成纤维细胞,通过G418筛选,获得阳性克隆进行核移植。[结果]获得2头PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre酶的转基因猪。[结论]成功构建了PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪,为研究piRNA及其相关基因的功能和机制提供了工具猪。

关 键 词:piRNA  PIWIL1  Cre酶  转基因猪

Construction of Transgenic Swine Specifically Expressing Cre Recombinase Controlled by PIWIL1 Promoter
Affiliation:DUAN Xin-ping et al(Jilin Provincial Key Laboratory of Animal Embryo Engineering,College of Animal Science and Veterinary Medicine,Jilin University,Changchun,Jilin 130062)
Abstract:[Objective] The aim was to generate transgenic pig specifically expressing Cre recombinase controlled by PIWIL1 promoter and make basic contribution for research on piRNA and its related genes’ function and mechanism.[Method] The promoter of pig PIWIL1 gene was amplified by PCR method.Replace the MHC promoter of pig specific Cre recombinase expression plasmid(pET28a-MHC-Cre-BGHpo1yA-FRT2neor) with PIWIL1 promoter and specific Cre recombinase plasmid(pPIWIL1-Cre) was obtained.Transfect the plasmid to mini-pig fetal fibroblast cells and screen for positive clones with drug and do nuclear transfer.[Result] Two transgenic pigs of specific expressing Cre recombinase controlled by PIWILI promoter were got.[Conclusion] We generate transgenic pigs that specifically express Cre recombinase successfully and make possible tools for piRNA and related gene function and mechanism research.
Keywords:piRNA  PIWIL1  Cre enzyme  Transgenic swine
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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