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猪β防御素-1基因乳腺特异性表达载体的构建
作者姓名:陈建文  刘星  范彩云  李运生  包文斌  吴圣龙  章孝荣  张运海
作者单位:安徽农业大学动物科技学院安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室;扬州大学动物科学与技术学院
基金项目:国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2009ZX08006-004B)
摘    要:为构建标记基因可去除的β防御素-1(pBD-1)基因乳腺特异性表达载体,利用RT-PCR方法从猪脾脏中克隆获得pBD-1基因,再插入乳腺特异性表达骨架载体pBC1-neo中;经PCR、酶切电泳以及测序鉴定,确认成功构建出乳腺特异性表达pBD-1的载体。进一步将上述功能片段亚克隆至能将标记基因全部去除的骨架载体MCS-3s-loxP-GFP中,成功构建了一种筛选标记可全部去除的乳腺特异性3s-loxP-GFP-pBC1-pBD1转基因载体。该载体为研究pBD-1蛋白的抗菌活性、抗菌机制,以及创制乳腺高效表达pBD-1的转基因猪育种新材料和通过哺乳以提高新生仔猪抗病力奠定了基础。

关 键 词:  β防御素-1  标记去除  抗病育种  乳腺生物反应器  转基因动物
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