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一种高效的莱茵衣藻电转化方法
作者姓名:刘佳  何炫程  项晨  马伯宁  韦航涛  杨明峰
作者单位:北京农学院生物科学与工程学院,农业部华北都市农业重点实验室,北京102206;北京农学院生物科学与工程学院,农业部华北都市农业重点实验室,北京102206;北京农学院生物科学与工程学院,农业部华北都市农业重点实验室,北京102206;北京农学院生物科学与工程学院,农业部华北都市农业重点实验室,北京102206;北京农学院生物科学与工程学院,农业部华北都市农业重点实验室,北京102206;北京农学院生物科学与工程学院,农业部华北都市农业重点实验室,北京102206
摘    要:【目的】为了探明莱茵衣藻Chlamydomonas reinhardtii最佳的转化条件。【方法】将融合基因4CL-3aSTS与绿色荧光蛋白(GFP)分别作为目的基因,以aphVIII为抗性基因,采用电转化法将两种目的基因分别转入野生型(WT)莱茵衣藻和细胞壁缺失型莱茵衣藻(CC425)中。【结果】用巴龙霉素抗性筛选以及通过PCR验证与荧光共聚焦显微镜检测,证实目的基因在两种莱茵衣藻中成功表达。【结论】获得了一种高效的莱茵衣藻电转化方法,野生型衣藻转化率为11.07%,细胞壁缺失型衣藻转化率为49.67%。

关 键 词:莱茵衣藻  电转化  融合基因  绿色荧光蛋白  巴龙霉素
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