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鸡 PD 1胞外区基因的克隆表达及其蛋白生物学活性鉴定
引用本文:李博文,孙国鹏,王爱国,岳锋,张艳芳,朱艳平,银梅,杨媛,郭东光,王选年. 鸡 PD 1胞外区基因的克隆表达及其蛋白生物学活性鉴定[J]. 河南农业科学, 2014, 0(10)
作者姓名:李博文  孙国鹏  王爱国  岳锋  张艳芳  朱艳平  银梅  杨媛  郭东光  王选年
作者单位:1. 新乡学院 生命科学与技术系/生物技术研究中心,河南 新乡 453003; 河南科技学院 动物科学学院,河南 新乡 453003
2. 新乡学院 生命科学与技术系/生物技术研究中心,河南 新乡,453003
3. 河南科技学院 动物科学学院,河南 新乡,453003
摘    要:为研究鸡程序性细胞死亡因子1(PD 1)胞外区的生物学活性,根据 GenBank 中的鸡 PD 1基因序列,经生物信息学比对分析,设计鸡 PD 1胞外区特异性克隆引物,扩增目的基因,连接原核表达载体 pET 28a(+),构建重组表达载体 pET 28a PD 1,转化至 Rosetta(DE3)大肠杆菌,并对IPTG 浓度、诱导温度、诱导时间进行优化,对表达产物进行 SDS PAGE 和 Western blot 分析,应用流式细胞术对所获得重组蛋白的生物学活性进行鉴定。结果显示,成功克隆了鸡 PD 1胞外区基因;SDS PAGE 和 Western blot 分析结果表明,37℃、0.1 mmol/L IPTG 诱导4 h 时,PD 1胞外区融合蛋白表达量最高,以包涵体形式存在;流式细胞术分析结果表明,PD 1胞外区重组蛋白具有一定的生物学活性。

关 键 词:  程序性细胞死亡因子 1  胞外区  克隆  原核表达  生物学活性

Cloning,Prokaryotic Expression and Biologic Activity Identification of Chicken PD-1 Extracellular Region Gene
LI Bo-wen,SUN Guo-peng,WANG Ai-guo,YUE Feng,ZHANG Yan-fang,ZHU Yan-ping,YIN Mei,YANG Yuan,GUO Dong-guang,WANG Xuan-nian. Cloning,Prokaryotic Expression and Biologic Activity Identification of Chicken PD-1 Extracellular Region Gene[J]. Journal of Henan Agricultural Sciences, 2014, 0(10)
Authors:LI Bo-wen  SUN Guo-peng  WANG Ai-guo  YUE Feng  ZHANG Yan-fang  ZHU Yan-ping  YIN Mei  YANG Yuan  GUO Dong-guang  WANG Xuan-nian
Abstract:
Keywords:chicken  PD-1  extracelluar region  clone  prokaryotic expression  biological activity
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