| 新城疫病毒（NDV）-F基因（NDV-F）稳定表达P815细胞株的建立 |
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| 引用本文： | 许发芝,吴胜国,余为一.新城疫病毒（NDV）-F基因（NDV-F）稳定表达P815细胞株的建立[J].农业生物技术学报,2009,17(4):567-570. |
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| 作者姓名： | 许发芝 吴胜国 余为一 |
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| 作者单位： | 1. 安徽农业大学安徽省人兽共患病学重点实验室,合肥,230036
2. 安徽安丰堂动物药业有限公司,合肥,230036 |
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| 摘 要： | 在成功构建新城疫病毒(NDV)-F基因真核表达载体pCDNA3-NDV-F的基础上,应用脂质体LipofectamineTM2000介导法,将其转染小鼠肥大细胞瘤细胞株(P815),经过加入G418(600 靏/mL),筛选得到稳定的细胞克隆株,并进一步扩大培养.应用Trizol法提取细胞RNA,经RT-PCR鉴定,转染细胞提取物在1 600bp处出现目的条带.收集转染细胞,经Westernblot和免疫荧光法检测到表达的目的蛋白.将获得的细胞株在液氮中冻存6个月后检测,该细胞株仍能很好表达NDV-F基因,表明其具有高度稳定性,证明采用脂质体法已成功地建立了能够稳定表达NDV-F基因的细胞株.
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| 关 键 词： | 新城疫病毒-F基因(NDV-F) 稳定转染 P815细胞株 |
Establishment of P815 Cell Line Stably Expressing Newcastle disease virus-F Gene (NDV-F) |
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| XU Fa-zhi,WU Sheng-guo,YU Wei-yi.Establishment of P815 Cell Line Stably Expressing Newcastle disease virus-F Gene (NDV-F)[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2009,17(4):567-570. |
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| Authors: | XU Fa-zhi WU Sheng-guo YU Wei-yi |
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