HPLC法同时测定大鼠血浆中3种CYP 450 探针药物的浓度

建立同时测定大鼠血浆中3种细胞色素P450（CYP450）亚型酶( CYP1A2、CYP2C9、CYP3A4)活性的Cocktail探针药物的高效液相色谱（HPLC）检测方法，为相关肝药酶代谢研究提供方法学参考。分别取非那西丁，咪达唑仑和甲苯磺丁脲三种探针药物，制成混合探针溶液，用一种提取溶剂系统对3种探针药物同时提取，并用高效液相色谱法（HPLC）同时测定该3种探针药物的血药浓度，并对其进行专属性，线性范围及检测限，精密度，回收率，稳定性的验证。色谱条件选用Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为甲醇-50 mM磷酸盐缓冲对（45:55；pH3.2）；检测波长：230 nm；流速1.0 mL/min；柱温35 ℃。结果：非那西丁，咪达唑仑，甲苯磺丁脲的线性范围分别为0.10～10.0 μg/mL(r=0.9993)，0.05～5.0 μg/mL(r=0.9999)，0.10～50.0 μg/mL(r=0.9991)；方法回收率分别为79.28 %～87.91 %，76.43 %～85.36 %，82.79 %～90.61 %。该HPLC检测方法快捷，准确，灵敏度高，可以在同一次试验中，同时测定大鼠血浆中3种CYP450亚酶探针药物（非那西丁，甲苯磺丁脲，咪达唑仑）的浓度，各探针药物的吸收峰分离完全，无干扰，可用于开展某些受试药物对大鼠CYP450的3个主要亚型酶（CYP1A2，CYP2C9，CYP3A4）调控作用的相关研究。

Simultaneous determination of three probe drugs of CYP450 in rat plasma by HPLC