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甘蔗中性/碱性转化酶基因(SoNIN1)的克隆和表达分析
引用本文:牛俊奇,王爱勤,黄静丽,杨丽涛,李杨瑞. 甘蔗中性/碱性转化酶基因(SoNIN1)的克隆和表达分析[J]. 作物学报, 2014, 40(2): 253-263. DOI: 10.3724/SP.J.1006.2014.00253
作者姓名:牛俊奇  王爱勤  黄静丽  杨丽涛  李杨瑞
作者单位:1.广西大学农学院, 广西南宁 530005;2.亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 广西南宁 530005;3.中国农业科学院甘蔗研究中心 / 广西农业科学院甘蔗研究所 / 农业部广西甘蔗生物技术与遗传改良重点实验室 / 广西甘蔗遗传改良重点实验室, 广西南宁 530007;4.广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室, 广西南宁 530007
基金项目:本研究由国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2013AA102604), 国家国际合作项目(2008DFA30600, 2009DFA30820, 2013DFA31600), 广西自然科学基金重点项目(2011GXNSFF018002), 广西科学研究与技术开发计划项目(桂科产1123008-1, 桂科攻1222009-1B, 桂科合13999002, 桂科合1347004-2)和广西农科院团队项目(桂农科2011YT01)资助。
摘    要:中性/碱性转化酶(Alkaline/Neutral Invertase)能不可逆地催化蔗糖分解为葡萄糖和果糖, 在植物生长发育中起重要作用。本研究采用RT-PCR和RACE技术从甘蔗品种GT28心叶中克隆到甘蔗中性/碱性转化酶基因全长cDNA序列, 基因命名为SoNIN1。该基因全长2289 bp (GenBank登录号为JX109944), 开放阅读框为1812 bp, 编码603个氨基酸, 相对分子量为67.79 kD, 等电点为6.41。具有中性/碱性转化酶保守结构域, N-端不含跨膜结构和信号肽。其编码氨基酸序列与玉米、水稻和黑麦草的亲缘关系较近, 属于同一进化分支。利用染色体步移技术克隆到SoNIN1基因5¢侧翼启动子序列, 长度为1174 bp (GenBank登录号为KC854419)。启动子序列含有多个CAAT-box和TATA-box等基本作用元件, 参与分生组织特异性激活, 参与干旱诱导的MYB结合位点, 脱落酸、茉莉酸甲酯和赤霉素响应等作用元件。利用实时荧光定量PCR技术, 在生理成熟期甘蔗茎、叶、花序和芽中均能检测到SoNIN1的表达, 其表达量在叶中最高, 芽中次之, 而在+1节间最低。苗期根和叶中SoNIN1基因都受PEG和NaCl诱导表达。

关 键 词:甘蔗  中性/碱性转化酶  启动子  克隆  基因表达  
收稿时间:2013-03-01

Cloning and Expression Analysis of Sugarcane Alkaline/Neutral Invertase (SoNIN1) Gene
NIU Jun-Qi,HUANG Jing-Li,WANG Ai-Qing,YANG Li-Tao,LI Yang-Rui. Cloning and Expression Analysis of Sugarcane Alkaline/Neutral Invertase (SoNIN1) Gene[J]. Acta Agronomica Sinica, 2014, 40(2): 253-263. DOI: 10.3724/SP.J.1006.2014.00253
Authors:NIU Jun-Qi  HUANG Jing-Li  WANG Ai-Qing  YANG Li-Tao  LI Yang-Rui
Abstract:
Keywords:Sugarcane  Alkaline/neutral invertase  Promoter  Cloning  Gene expression
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