| 毛白杨4-CL cDNA的克隆、表达及活性分析 |
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| 引用本文： | 杨向东,王汉中,胡赞民,刘贵华,沈金雄. 毛白杨4-CL cDNA的克隆、表达及活性分析[J]. 华中农业大学学报, 2006, 25(2): 101-105 |
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| 作者姓名： | 杨向东 王汉中 胡赞民 刘贵华 沈金雄 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院油料作物研究所,武汉,430062;中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101 |
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| 基金项目： | 中国科学院资助项目;国家科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 从毛白杨(Populus tomentosa)木质化茎中提取总RNA,利用RT-PCR技术进行cDNA扩增,获得1条1 621 bp的片段。测序结果表明:该片段编码536个氨基酸组成的多肽,序列中包含所有已知4-CL蛋白的2个特征序列boxⅠ(SSGTTGLPKGV)和boxⅡ(GEICIRG)。将cDNA克隆到原核表达载体pET-32a( )中,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)感受态细胞BL21(DE3)。IPTG诱导后,经SDS-PAGE和Western-blot分析表明,4-CL基因在大肠杆菌BL21中获得表达,所表达融合蛋白的分子量约为70 ku。酶活性分析表明:该重组蛋白对底物PA、FA、CA均表现出催化活性,其偏爱性顺序为PA>FA>CA,对SA则没有活性。
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| 关 键 词： | 毛白杨 4-香豆酰辅酶A连接酶 原核表达 偏爱性 |
| 文章编号： | 1000-2421（2006）01-0101-05 |
| 收稿时间： | 2005-06-16 |
| 修稿时间： | 2005-06-16 |
The Cloning, Expression and Activity Assays of 4-CL cDNA from the Populus tomentosa |
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| YANG Xiang-dong,WANG Han-zhong,HU Zan-min,LIU Gui-hu,SHEN Jin-xiong. The Cloning, Expression and Activity Assays of 4-CL cDNA from the Populus tomentosa[J]. Journal of Huazhong Agricultural University, 2006, 25(2): 101-105 |
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| Authors: | YANG Xiang-dong WANG Han-zhong HU Zan-min LIU Gui-hu SHEN Jin-xiong |
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| Affiliation: | 1. Oil Crops Institute ,Chinese Academy of Agricultural Sciences ,Wuhan 430062,China; 2. Institute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Populus tomentosa 4-coumarate: CoA ligase protokaryotic expression preference |
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