苏云金芽孢杆菌δ-内毒素基因导入水稻原生质体后获得转基因植株

本实验将苏云金芽孢杆菌的δ-内毒素基因导入水稻原生质体并得到了具有这种基因的转化水稻植株。所用的重组质粒Pgy61和Pgyck63带有一个由35S启动子,δ-内毒素蛋白基因，β-葡萄糖苷酸酶（GUS）报告基因和NOS终止子组成的嵌合基因。δ-内毒素基因与GUS基因是融合基因，而且GUS基因在δ-内毒素基因的下游。水稻原生质体是从细胞悬浮系中分离出来，用聚乙二醇（PEG）方法将带有δ-内毒素基因的质粒导入水稻原生质体。经荧光法测定，由这些原生质体产生的愈伤组织具有很高的β-葡萄糖苷酸酶活性，说明β-葡萄糖苷酸酶基因在水稻愈伤组织中得到表达，表明δ-内毒素基因在水稻愈伤组织中已被翻译（表达）。另外，从这些转化的愈伤组织中得到正常的绿色植株，经分子杂交（Southern Blot）证明δ-内毒素基因已整合进水稻基因组中。