禽流感病毒人工感染鸡抗体的监测及血凝素分型血清的制备

从英国中心兽医实验室（ＣＶＬ）引进禽流感病毒１４种血凝素亚型（Ｈ１～Ｈ１４）的标准毒株，经９～１１日龄的ＳＰＦ鸡胚增殖、传代后收取感染鸡胚的羊水及尿囊液，经１０００ｘｇ离心１５分钟后，收取上清作为免疫原。取８只１２周龄ＳＰＦ鸡分成Ａ、Ｂ两组，进行人工感染鸡的抗体消长规律试验。选用Ｈ３毒株制备的免疫原，按１ｍｌ／只的剂量翅静脉接种Ａ、Ｂ两组的８只ＳＰＦ鸡，１周后Ｂ组的４只鸡复免一次，分别用ＨＩ和ＡＧＰ试验测定２种方法免疫鸡的抗体水平．监测结果表明：经１次免疫的鸡（Ａ组）于免疫后１５天ＨＩ抗体升至最高，以后抗体逐渐下降，且产生的抗体个体差异不大，ＡＧＰ试验结果只有于免疫后２０～５５天内全部为阴性；经重复免疫的鸡（Ｂ组），于初免后１５～４５天内ＨＩ抗体都维持较高水平，且产生的抗体个体差异不大，ＡＧＰ试验结果在初免疫后１５７５天内全部为阳性。据此，我们根据禽流感病毒株毒力的强弱（参照其ＥＩＤ５０，用纯化后的鸡胚尿囊液制备的免疫原，按０５～２５ｍｌ／只的剂量分别免疫１２周龄ＳＰＦ鸡，１周后加强免疫一次于二免后１０～１５天放血，制备出禽流感病毒１４个血凝素亚型的分型血清，并有霍乱滤液（ＲＤＥ）法对血清进行了处理。