产肠毒素大肠杆菌987P抗原的纯化

猪产肠毒素大肠杆菌987P阳性菌株,在胰酶大豆肉汤培养基中于37℃生长18—20小时,离心收集细菌。通过高速搅拌使987P纤毛从菌体上脱落。用差速离心除去菌体和大的细胞碎片后,以硫酸铵盐析法初步纯化上清液中的987P纤毛。再经制备电泳进一步分离纯化即可得纯化的987P抗原。纯化的987P抗原在电镜下是均质的,强烈地聚集成束。显示出刚硬、中空的纤毛结构。在10%的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈现出单一的蛋白带,测出其蛋白质亚单位的分子量为20128。以初步纯化的抗原高免兔子制得高效价的抗血清。