无选择标记转高赖氨酸蛋白基因水稻植株的培育

利用农杆菌介导遗传转化方法,将带有分别由Ubi组成型启动子和GluB-4水稻种子特异型启动子调控的GsHLP2/GsHLP8基因、选择标记基因为Bar基因的双T-DNA植物表达载体pTTBUG2、pTTBUG8、pTTBGG2、pTTBGG8转入水稻。共获得转化苗124株,PCR结果表明,高赖氨酸蛋白基因GsHLP2/GsHLP8及Bar基因已经共转化到水稻基因组上,共转化率为61.1%。通过Bialaphos抗性试验对转基因后代进行抗性检测,结果表明T1种子对Bialaphos的抗性出现分离。进而对T1代植株进行PCR检测,获得只含有目的基因而不含有选择标记基因的植株,为培育无选择标记转高赖氨酸蛋白基因水稻提供材料。