羟基阿特拉津脱乙胺基水解酶(AtzB)典型酶学性质的研究 |
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引用本文: | 张颖,梁海晶,马广鹏,姜昭,王志刚,南超,王溪,葛世杰.羟基阿特拉津脱乙胺基水解酶(AtzB)典型酶学性质的研究[J].东北农业大学学报,2013(5):18-23. |
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作者姓名: | 张颖 梁海晶 马广鹏 姜昭 王志刚 南超 王溪 葛世杰 |
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作者单位: | 东北农业大学资源与环境学院;中国农村技术开发中心;齐齐哈尔大学生命科学与农林学院 |
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基金项目: | 国家“十二五”科技计划项目(2011BAD04B02-1) |
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摘 要: | 采用Ni-NTA亲和层析法对基因重组菌中的羟基阿特拉津脱乙胺基水解酶(AtzB)进行分离纯化,并对该酶的典型酶学性质进行研究。纯化处理后,AtzB的纯度提高15倍,酶活回收率高达15.2%。酶学性质研究表明,AtzB的最适反应温度为40℃;最适反应pH为9.0。在最适反应条件下,AtzB对底物最大反应速率Vmax为3.17μmol.L-1.min-1,米氏常数Km为0.45 mmol.L-1。反应缓冲液中Cu(Ⅱ)对酶活力有相对较强的抑制作用(P<0.05),Zn(Ⅱ)对酶活力影响相对较小(P<0.05),而Co(Ⅱ)、Cr(Ⅲ)、Ca(Ⅱ)和Ni(Ⅱ)则对酶活力基本没有影响。盐度对AtzB活力影响较大,当缓冲液中NaCl浓度达到1 mol.L-1时,AtzB完全失活。
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关 键 词: | 羟基阿特拉津脱乙胺基水解酶 羟基阿特拉津 蛋白纯化 酶学性质 |
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