| 禽腺病毒4型荧光定量PCR检测方法的建立与初步评估 |
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| 引用本文： | 王国康,卢琴,贾妙妙,李丽,冯贺龙,邵华斌,罗青平,曾驰,温国元.禽腺病毒4型荧光定量PCR检测方法的建立与初步评估[J].中国兽医杂志,2022(2):22-26. |
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| 作者姓名： | 王国康 卢琴 贾妙妙 李丽 冯贺龙 邵华斌 罗青平 曾驰 温国元 |
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| 作者单位： | 1. 武汉轻工大学生物与制药工程学院;2. 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所;3. 农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室;4. 畜禽病原微生物学湖北省重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2017YFD0501104)；;国家现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-43-G13)；;国家自然科学基金项目(31873018,31670157)；;湖北省自然科学基金杰出青年人才项目(2019CFA071)； |
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| 摘 要： | 为了对禽腺病毒4型(FAdV-4)引发的鸡心包积水-肝炎综合征的病原学监测和疫情诊断提供技术支撑，本研究经对部分发表在NCBI的禽腺病毒4型序列进行比对，在其六邻体基因上找到一段相对保守序列，并设计出PCR引物和TaqMan探针。以FAdV-4 HB1510株作为标准品，通过反应条件优化，建立了FAdV-4荧光定量PCR检测方法，并对其敏感性、特异性和重复性进行了分析。结果显示，该方法的灵敏度为10 EID50/mL,为常规PCR方法的10倍；组内和组间重复性良好；与鸡减蛋综合征病毒、大肠杆菌等禽类病原的核酸无交叉反应。通过对65份临床样品进行检测，FAdV-4荧光定量PCR和常规PCR的检测符合率为90.7%。因此，FAdV-4荧光定量PCR的快速、敏感、特异等优点使其在禽腺病毒4型的早期检测及预防、控制等方面有较好的应用前景。
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| 关 键 词： | 禽腺病毒4型 TaqMan探针 荧光定量PCR 检测 |
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