基于GAPDH重组蛋白建立羊肝片吸虫病间接ELISA检测方法

为了建立早期羊肝片吸虫病的血清学快速检测方法，本试验成功克隆并表达肝片吸虫GAPDH重组蛋白，Western blot结果显示，该重组蛋白具有良好的抗原活性。用肝片吸虫GAPDH重组抗原包被，建立肝片吸虫病血清抗体的间接ELISA方法；随后优化反应的最佳血清稀释度和抗原包被量，同时筛选其他反应条件。结果显示，间接ELISA方法批内和批间重复试验的最大变异系数均小于10%,GAPDH重组抗原与华枝睾吸虫、日本血吸虫和捻转血矛线虫阳性血清均无交叉反应。对来自黑龙江省各地区的96份羊血清进行检测，阳性率为16.67%(16/96)。结果表明本试验建立的方法具有良好的敏感性和特异性，能够为早期诊断羊肝片吸虫病提供参考。