| 禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因壳聚糖纳米DNA疫苗的制备与检测 |
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| 引用本文： | 宫强,孔梁宇,牛明福.禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因壳聚糖纳米DNA疫苗的制备与检测[J].中国兽医学报,2018(3):491-495. |
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| 作者姓名： | 宫强 孔梁宇 牛明福 |
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| 作者单位： | 河南科技大学畜禽疫病诊断与食品安全检测河南省工程实验室/河南科技大学微生物资源开发与利用重点实验室; |
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| 摘 要： | 为制备禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因壳聚糖纳米DNA疫苗,PCR扩增获得ptfa基因片段,克隆于真核表达载体pcDNA3.1(+)中构建重组质粒,以复凝聚法制备ptfa基因的壳聚糖纳米DNA疫苗。通过凝胶阻滞试验确定壳聚糖与DNA分子完全结合时的N/P比值;测定纳米DNA疫苗的包封率;透射电镜观察纳米DNA疫苗的形态;同时检测其抗DNA酶降解的能力及稳定性。结果成功构建禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因的裸DNA疫苗并制备出纳米DNA疫苗,该纳米DNA疫苗的N/P比值为2.5,包封率为95.3%,经电镜观察显示其形态大多呈规则的球状,粒径为200nm左右,且具有较好的稳定性,可有效抵抗DNA酶Ⅰ的降解。从而为进一步研究其免疫保护效果奠定了一定的基础。
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| 关 键 词： | 禽多杀性巴氏杆菌 ptfa基因 壳聚糖 纳米DNA疫苗 |
Preparation and detection of the ptfachitosan nanoparticle DNA vaccine of avian Pasteurella multocida |
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