莴苣花叶病毒RT-RPA检测方法的建立 |
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引用本文: | 向均,王垚,文朝慧,张永江.莴苣花叶病毒RT-RPA检测方法的建立[J].植物检疫,2018(4). |
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作者姓名: | 向均 王垚 文朝慧 张永江 |
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作者单位: | 中国检验检疫科学研究院;甘肃出入境检验检疫局 |
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摘 要: | 根据莴苣花叶病毒(Lettuce mosic virus,LMV)的外壳蛋白保守位点设计引物,并构建片段大小为428 bp的内标质粒,利用引物和内标质粒对可侵染莴苣的5种病毒和与LMV同属的3种病毒进行反转录重组酶聚合酶扩增技术(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)检测。结果表明,该方法特异性强,可从阳性样品RNA中扩增出大小为272 bp的目标片段,而其他7种病毒RNA、空白对照以及阴性对照均未扩增出条带;灵敏度高,能检测出稀释100倍的LMV RNA,与常规RT-PCR灵敏度一致;速度快,整个扩增过程只需要40 min,不需要特殊设备。本研究建立的RT-RPA检测方法可应用于LMV的快速检测。
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