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E.tenella河北株重组IL-2-EtMIC-2 DNA疫苗的构建及保护力分析
引用本文:张召兴,张香斋,李蕴玉,丁咚,张志强,吴同垒,贾青辉,张艳英,李佩国.E.tenella河北株重组IL-2-EtMIC-2 DNA疫苗的构建及保护力分析[J].中国兽医学报,2018(1):77-81.
作者姓名:张召兴  张香斋  李蕴玉  丁咚  张志强  吴同垒  贾青辉  张艳英  李佩国
作者单位:河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室;沧州职业技术学院;
摘    要:为了构建E.tenella河北株重组IL-2-EtMIC-2DNA疫苗,并确定其抗球虫效力。采用RT-PCR方法分别克隆出鸡IL-2和E.tenella河北株EtMIC-2基因,并连接到pMD18-T载体上进行测序;将目的基因克隆到pcDNA3.0载体,构建重组质粒pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2,并转染293T细胞,用Western blot方法验证表达。将构建的重组IL-2-EtMIC-2DNA疫苗以50,100,150μg/只的剂量分别在14,21日龄胸肌注射免疫试验鸡,除阴性对照组外,28日龄时经口灌服孢子化E.tenella卵囊4×10~4个,研究其对E.tenella感染后的免疫保护效果。结果表明:成功构建了重组质粒pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2,且能在293T细胞中表达出融合蛋白;3个免疫组的ACI比阳性对照组分别提高了97.63%,127.02%和129.81%,其中免疫剂量为100,150μg时,ACI均达160以上,具有良好的免疫保护效果。

关 键 词:柔嫩艾美耳球虫  EtMIC-2基因  IL-2基因  DNA疫苗

Construction and protective efficacy evaluation of the recombinant IL-2-EtMIC-2 DNA vaccine against Eimeria tenella of Hebei strain
Abstract:
Keywords:
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