| 四种分子伴侣促进牛支原体膜蛋白在大肠杆菌中可溶性表达研究 |
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| 引用本文： | 王艳芳,周雅坪,张新竹,李松建,麻昌姣,黄海碧,郝永清.四种分子伴侣促进牛支原体膜蛋白在大肠杆菌中可溶性表达研究[J].中国农业大学学报,2018,23(12):75-83. |
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| 作者姓名： | 王艳芳 周雅坪 张新竹 李松建 麻昌姣 黄海碧 郝永清 |
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| 作者单位： | 内蒙古农业大学 兽医学院, 呼和浩特 010018;包头医学院 基础医学与法医学院, 内蒙古 包头 014060,内蒙古农业大学 兽医学院, 呼和浩特 010018,内蒙古农业大学 兽医学院, 呼和浩特 010018,内蒙古农业大学 兽医学院, 呼和浩特 010018,内蒙古农业大学 兽医学院, 呼和浩特 010018,内蒙古农业大学 兽医学院, 呼和浩特 010018,内蒙古农业大学 兽医学院, 呼和浩特 010018;内蒙古农业大学 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室, 呼和浩特 010018 |
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| 基金项目： | 2017年内蒙古农业大学动植物新品种选育（培育）专项（YZGC2017027）；国家科技支撑计划（2012BAD13B00） |
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| 摘 要： | 为研究分子伴侣是否可以促进牛支原体膜蛋白在大肠杆菌中以可溶性形式表达及表达的蛋白是否具有活性,应用原核表达和Western blot方法进行检测,结果表明:1)牛支原体一个膜蛋白M1的截短片段在大肠杆菌表达系统中以包涵体形式表达,改变诱导时间、温度以及诱导剂浓度均未改变其表达形式;2)将4种分子伴侣pGKJE8、pGro7、pG-Tf2和pTf16分别与含有目的蛋白的重组质粒在表达工程菌(BL21)中共表达,当加入终浓度为1.0mmol/L IPTG以及0.5mg/mL L-阿拉伯糖或5.0ng/mL四环素的诱导剂,37℃诱导5h,发现分子伴侣pGTf2和pG-KJE8能显著提高M1截短片段的可溶性表达,其他2种分子伴侣未改变M1的表达形式;3)可溶性表达的M1截短片段与牛支原体阳性血清可以发生特异性反应。因此,研究发现2种分子伴侣可以使牛支原体膜蛋白在大肠杆菌表达系统中以可溶性形式表达,但未改变其生物活性,该研究结果可为建立牛支原体有效的血清学诊断方法及亚单位疫苗的研制奠定基础。
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| 关 键 词： | 分子伴侣 牛支原体 膜蛋白 可溶性表达 原核表达系统 |
| 收稿时间： | 2018/2/5 0:00:00 |
Soluble expression promotion of Mycoplasma bovine membrane protein by four types molecular chaperones in Escherichia coli |
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| WANG Yanfang,ZHOU Yaping,ZHANG Xinzhu,LI Songjian,MA Changjiao,HUANG Haibi and HAO Yongqing.Soluble expression promotion of Mycoplasma bovine membrane protein by four types molecular chaperones in Escherichia coli[J].Journal of China Agricultural University,2018,23(12):75-83. |
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| Authors: | WANG Yanfang ZHOU Yaping ZHANG Xinzhu LI Songjian MA Changjiao HUANG Haibi and HAO Yongqing |
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| Institution: | College of Veterinary Science, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China;College of Preclinical and Forensic Medicine, Baotou Medical College, Baotou 014040, China,College of Veterinary Science, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China,College of Veterinary Science, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China,College of Veterinary Science, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China,College of Veterinary Science, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China,College of Veterinary Science, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China and College of Veterinary Science, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China;Key Laboratory of Animal Genetics and Genomics of Ministry of Agriculture, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | molecular chaperone Mycoplasma bovis membrane protein soluble expression prokaryotic expression system |
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