猪霍乱沙门菌RPA-LFS快速检测方法的建立

为建立一种快速、准确的猪霍乱沙门菌现场检测方法，针对猪霍乱沙门菌侵袭蛋白A(Invasion protein A,invA)基因序列设计特异性引物和探针，优化反应条件，建立重组酶聚合酶等温扩增结合侧向流层析试纸条（RPA-LFS）检测方法。结果表明：建立的方法在39℃等温条件下15 min内即可特异性检出猪霍乱沙门菌，与金黄色葡萄球菌、副猪嗜血杆菌、巴氏杆菌、铜绿假单胞菌、单增李斯特菌无交叉反应，该方法对猪霍乱沙门菌的最低检出限为1 CFU/反应；应用该方法对50份猪肉样本进行检测，与PCR方法检测结果一致。建立的猪霍乱沙门菌现场RPA-LFS检测方法敏感性高、特异性强、反应快速、操作简便的特点，可应用于猪霍乱沙门菌的临床快速检测。