| 2种不同无色孔雀石绿单克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 陈 力,胡 鲲,姜有声.2种不同无色孔雀石绿单克隆抗体的制备[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2011,39(7):28-34. |
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| 作者姓名： | 陈 力 胡 鲲 姜有声 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学国家水生动物病原库;中国水产科学研究院东海水产研究所;连云港市海洋与水产科学研究所; |
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| 基金项目： | 现代农业产业技术体系建设专项资金项目(NYCYTX-49-17); 公益性行业(农业)科研专项经费项目(nyhyzx07-042);公益性行业(农业)科研专项经费项目(200803013) |
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| 摘 要： | 【目的】制备无色孔雀石绿(LMG)单克隆抗体,并分析其生物学特性,为建立LMG残留的免疫学检测方法奠定基础。【方法】通过改进的碳二亚胺法制备无色孔雀石绿-牛血清白蛋白偶联物(LMG-BSA)与副品红-牛血清白蛋白偶联物(PA-BSA),用紫外扫描、质谱法方法鉴定偶联物。利用制备的LMG-BSA与PA-BSA作为免疫原,免疫4~5周龄Balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备LMG单克隆抗体,并对其效价、亲和力、灵敏度和特异性等进行分析。【结果】LMG-BSA与PA-BSA的偶联比率分别为7∶1和37∶1;经间接酶联免疫吸附(ELISA)法筛选,由LMG-BSA和PA-BSA抗原各获得1株杂交瘤细胞,分别命名为L-1、P-1。这2株细胞株分泌的单克隆抗体纯化后,经测定效价分别为1.25×105和6.25×106,亲和力常数分别为4.92×109和1.44×108L/mol,半抑制质量浓度(IC50)分别达8.03和10.5μg/L。L-1分泌的单克隆抗体仅与孔雀石绿存在交叉反应,交叉反应率为100%;P-1分泌的单克隆抗体与孔雀石绿及副品红均存在交叉反应,交叉反应率分别为80%与100%。【结论】成功获得了2株LMG单克隆抗体,其均可用于水产品中LMG残留的快速检测。
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| 关 键 词： | 无色孔雀石绿 副品红 半抗原 抗体 免疫 |
| 收稿时间： | 2010/12/26 0:00:00 |
Preparation of two different monoclonal antibodies against leuco malachite green |
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| CHEN Li,HU Kun,JIANG You-sheng,HUANG Xuan-yun,AN Jian,YANG Xian-le.Preparation of two different monoclonal antibodies against leuco malachite green[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2011,39(7):28-34. |
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| Authors: | CHEN Li HU Kun JIANG You-sheng HUANG Xuan-yun AN Jian YANG Xian-le |
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| Institution: | CHEN Li1,HU Kun1,JIANG You-sheng1,HUANG Xuan-yun2,AN Jian3,YANG Xian-le1(1 Shanghai Ocean University,State Collection Center of Aquatic Pathogen,Shanghai 201306,China,2 East China Sea Fishery Research Institute Chinese Academy of Fishery Sciences,Shanghai 200090,3 Marine Fisheries Research Institute of Lianyungang,Lianyungang,Jiangsu 222042,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | leuco malachite the green paraleucaniline hapten antibody immunity |
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