| 产气荚膜梭菌α毒素基因的定点突变与表达 |
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| 引用本文： | 许崇利,许崇波. 产气荚膜梭菌α毒素基因的定点突变与表达[J]. 江苏农业学报, 2010, 26(2) |
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| 作者姓名： | 许崇利 许崇波 |
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| 作者单位： | 1. 吉林化工学院环境与生物工程学院,吉林,吉林,132022;大连大学医学院,辽宁,大连,116622
2. 大连大学医学院,辽宁,大连,116622 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30972188) |
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| 摘 要： | 选择可能影响α毒素生物活性的氨基酸相关碱基位点进行定点突变,构建α毒素基因的突变体并在大肠杆菌中表达。利用PCR定点突变技术,进行第68位组氨酸→亮氨酸的定点突变,构建含α毒素突变基因表达质粒的重组菌株BL21(DE3)pLys(pXMCPA02)。结果表明,α毒素突变基因第287位核苷酸由A→T,经酶切鉴定和序列测定证实,构建的重组质粒pXMCPA02含有α毒素突变基因,且基因序列和阅读框架正确;重组菌株BL21(DE3)pLys(pXMCPA02)表达产物经SDS-PAGE分析,其表达量占菌体总蛋白相对含量的33.82%。因此,已成功构建了α毒素基因突变体,并实现了在重组大肠杆菌中的表达。
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| 关 键 词： | 产气荚膜梭菌 α毒素基因 定点突变 表达 |
Site-directed Mutagenesis and Expression of Clostridium perfringens Alpha-toxin Gene |
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| XU Chong-li,XU Chong-bo. Site-directed Mutagenesis and Expression of Clostridium perfringens Alpha-toxin Gene[J]. Jiangsu Journal of Agricultural Sciences, 2010, 26(2) |
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| Authors: | XU Chong-li XU Chong-bo |
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| Affiliation: | 1.College of Environment and Bioengineering/a>;Jilin Institute of Chemical Technology/a>;Jilin 132022/a>;China/a>;2.College of Medicine/a>;Dalian University/a>;Dalian 116622/a>;China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Clostridium perfringens alpha-toxin site-directed mutagenesis expression |
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