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抗脂肪细胞40 000特异膜蛋白scFv-Fc融合抗体毕赤酵母表达载体的构建
引用本文:高士争,尹革芬,张玉静,汪磊,张曦.抗脂肪细胞40 000特异膜蛋白scFv-Fc融合抗体毕赤酵母表达载体的构建[J].中国兽医学报,2007,27(3):376-381,386.
作者姓名:高士争  尹革芬  张玉静  汪磊  张曦
作者单位:1. 云南农业大学,云南省动物营养与饲料重点实验室,云南,昆明,650201
2. 云南农业大学,动物科技学院,云南,昆明,650201
3. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
4. 华东师范大学,生命科学系,上海,200062
基金项目:国家自然科学基金;云南省自然科学基金
摘    要:采用RT—PCR方法从人外周血淋巴细胞克隆IgG1 Fc片段基因,经序列分析表明,该Fc片段基因长699bp,具有完整的铰链区、CH2和CH3结构区,与GenBank中人IgG1重链Fc片段基因序列完全相同。将Fc片段基因与pPICZaA酵母载体连接先构建pPIgG1质粒,然后将抗脂肪细胞40000特异膜蛋白的噬菌体scFv抗体基因插入到pPIgG1质粒,构建pPIgG1-scFv酵母表达载体。序列分析表明,scFv基因与Fc片段基因拼接正确,阅读框正确无误,表明成功构建了抗脂肪细胞40000特异膜蛋白scFv—Fc融合抗体毕赤酵母表达载体。本试验为下一步在毕赤酵母中大量表达与IgG结构相似、具有较高亲和力和生物活性的scFv—Fc融合抗体分子奠定了基础。

关 键 词:脂肪细胞  单链抗体  毕赤酵母  表达载体
文章编号:1005-4545(2007)03-0376-06
修稿时间:2006-12-27

Construction of Pichia pastoris expression vector for production of scFv-Fc fusion antibody against 40 000 adipocyte-specific plasma membrane protein
GAO Shi-zheng,YIN Ge-fen,ZHANG Yu-jing,WANG Lei,ZHANG Xi.Construction of Pichia pastoris expression vector for production of scFv-Fc fusion antibody against 40 000 adipocyte-specific plasma membrane protein[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2007,27(3):376-381,386.
Authors:GAO Shi-zheng  YIN Ge-fen  ZHANG Yu-jing  WANG Lei  ZHANG Xi
Institution:1. Yunnan Key Laboratory of Animal Nutrition and Feed Science, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201, China; 2. College of Animal Science and Technology, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201, China; 3. College of Veterinary Medic. ine, Jilin University, Changchun 130062, China; 4. School of Life Sciences, East China Normal University, Shanghai 200062, China
Abstract:
Keywords:adipocyte  single-chain antibody  Pichia pastoris  expression vector
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