| 绵羊附睾GPX5的抗氧化功能研究 |
| |
| 引用本文： | 栾兆进,赵勇超,宋慧子,等. 绵羊附睾GPX5的抗氧化功能研究[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2022, 50(8): 8-14 |
| |
| 作者姓名： | 栾兆进 赵勇超 宋慧子 等 |
| |
| 作者单位： | 内蒙古农业大学 动物科学学院/内蒙古自治区动物遗传育种与繁殖重点实验室,包头医学院 基础医学与法医学院 |
| |
| 基金项目： | 内蒙古自治区科技重大专项（2020ZD0003） |
| |
| 摘 要： | 【目的】利用体外培养的绵羊附睾上皮细胞（EECs）探究谷胱甘肽过氧化物酶5（GPX5）的抗氧化功能。【方法】体外分离培养并鉴定绵羊EECs后备用。筛选合成3条GPX5的siRNA序列（siRNA-N.1、siRNA-N.2、siRNA-N.3），同时随机设计一段不与GPX5重合的扰码（scramble）序列（siRNA-NC），采用瞬时转染法转染EECs，以正常的EECs为对照（CK），于转染34 h后取样，从mRNA和蛋白水平检测GPX5的干扰效果。采用CCK-8法检测GPX5干扰组、siRNA-NC组和CK组EECs的增殖能力，采用DCFH-DA探针法检测其活性氧（ROS）水平，采用TBA法检测其丙二醛（MDA）水平，采用免疫荧光法检测其8 羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）水平。【结果】分离培养的细胞可与角蛋白18（CK18）特异性抗体反应，表明细胞为EECs，可用于后续试验。siRNA-N.3（即siRNA-GPX5）对EECs GPX5mRNA和蛋白表达的干扰效果最优，可用于后续试验。随着过氧化氢（H2O2）处理浓度的增加，与CK组相比，siRNA-GPX5组EECs的增殖能力持续下降。与CK组相比，siRNA-GPX5组EECs中的ROS和MDA水平分别极显著（P＜0.01）和显著（P＜0.05）升高，8-OHdG水平明显上升。【结论】GPX5可以有效保护绵羊EECs，使其免受脂质过氧化损伤及DNA氧化损伤。
|
| 关 键 词： | 绵羊；附睾上皮细胞；谷胱甘肽过氧化物酶5(GPX5)；抗氧化能力 |
| 收稿时间： | 2021-09-03 |
Antioxidant function of GPX5 gene in epididymis of sheep |
| |
| LUAN Zhaojin,ZHAO Yongchao,SONG Huizi,et al. Antioxidant function of GPX5 gene in epididymis of sheep[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2022, 50(8): 8-14 |
| |
| Authors: | LUAN Zhaojin ZHAO Yongchao SONG Huizi et al |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | sheep epididymal epithelial cells glutathione peroxidase 5(GPX5) antioxidation capacity |
|
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(自然科学版)》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《西北农林科技大学学报(自然科学版)》下载全文 |
