| 犬轮状病毒荧光定量RT—PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 魏锁成,何丽.犬轮状病毒荧光定量RT—PCR检测方法的建立[J].中国动物检疫,2009,26(5):38-41. |
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| 作者姓名： | 魏锁成 何丽 |
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| 作者单位： | 西北民族大学动物医学研究所,甘肃兰州,730030 |
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| 基金项目： | 国家民委重点项目，甘肃省科技支撑项目 |
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| 摘 要： | 目的:建立轮状病毒快速准确的检测方法,为研发诊断试剂盒和疫苗奠定基础。方法:用Primer5软件设计VP7引物,从采集的腹泻犬粪便样品抽提病毒RNA,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,将RNA反转录为cDNA,并进行PCR扩增,对扩增产物进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和测序,与代表株的VP7进行同源性比较。结果:从腹泻病犬粪便样品中抽提到了轮状病毒RNA,反转录后扩增产物为51bp的基因片段,经核苷酸序列分析,其PCR序列与犬轮状病毒VP7基因编码源序列的同源性为86.3%。结论:正确克隆了轮状病毒主要保护性抗VP7基因中抗原表位区,建立了犬轮状病毒实时定量诊断方法,为研制实时定量诊断试剂盒奠定了基础。
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| 关 键 词： | 轮状病毒 VP7 RT-PCR 实时荧光定量PCR |
Construction of real-time fluorescence quantitative RT-PCR method for detecting canine rotavirus |
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| WEI Suocheng,HE Li.Construction of real-time fluorescence quantitative RT-PCR method for detecting canine rotavirus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2009,26(5):38-41. |
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| Authors: | WEI Suocheng HE Li |
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| Institution: | (Animal Medicine Institute of Northwest University for Nationalities, Lanzhou Gansu 730030, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | VP7 RT-PCR |
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