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| IBDV荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其应用 | |
| 引用本文： | 何秀苗,甘珊珊,熊忠贤,禤金彩,廖艳娟,韦平. IBDV荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其应用[J]. 西南农业学报, 2013, 26(2) |
| 作者姓名： | 何秀苗 甘珊珊 熊忠贤 禤金彩 廖艳娟 韦平 |
| 作者单位： | 1. 广西民族大学化学与生物转化过程重点实验室,广西南宁530006;广西林产化学与工程重点实验室,广西南宁530006 2. 广西民族大学化学与生物转化过程重点实验室,广西南宁,530006 3. 广西大学,广西南宁,530005 |
| 基金项目： | 广西青年科学基金项目，广西自然科学基金项目 |
| 摘 要： | 研究根据传染性法氏囊病病毒(IBDV) VP2基因序列设计了两条引物,通过RT-PCR技术对IBDV的VP2进行扩增,构建IBDV-VP2的标准品质粒,建立基于IBDV-VP2基因的荧光定量RT-PCR检测(QRT-PCR)技术和标准曲线,并检测该QRT-PCR体系的特异性、灵敏度和重复性,最后将该QRT-PCR体系应用于鸡外周血淋巴细胞(PBLs)中IBDV超强毒株(vvIBDV)复制规律以及临床样品的检测.结果表明,建立的QRT-PCR体系特异性好,不能与NDV、IBV及FAV1等发生反应,敏感度为1.51×101拷贝数/μl,扩增效率达1.018,重复性试验组内变异系数和组间变异系数均小于0.5％；在vvIBDV感染后6h收获的细胞含病毒基因组拷贝数最高,对IBD疑似病例的检测敏感度高于套式RT-PCR技术.表明建立的反应体系特异、灵敏度高,并具有很好的稳定性,可应用于病毒复制水平的检测和临床样品的检测. |
| 关 键 词： | 鸡传染性法氏囊病 荧光定量RT-PCR 鸡外周血淋巴细胞 |
Development and Application of Real Time Quantitative RT-PCR Assay for IBDV Detection |
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| HE Xiu-miao , GAN Shan-shan , XIONG Zhong-xian , XUAN Jin-cai , LIAO Yan-juan , WEI Ping. Development and Application of Real Time Quantitative RT-PCR Assay for IBDV Detection[J]. Southwest China Journal of Agricultural Sciences, 2013, 26(2) | |
| Authors: | HE Xiu-miao GAN Shan-shan XIONG Zhong-xian XUAN Jin-cai LIAO Yan-juan WEI Ping |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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