黑曲霉木聚糖酶结构基因和5'调控区基因克隆及其分析 |
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作者姓名: | 白爱枝 闫祖威 唐国敏 梁运章 |
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作者单位: | 1. 内蒙古农业大学,动物科学与医学学院,内蒙古,呼和浩特,010018;内蒙古自治区离子束生物工程重点实验室,内蒙古,呼和浩特,010021 2. 内蒙古农业大学,动物科学与医学学院,内蒙古,呼和浩特,010018 3. 中国科学院,微生物研究所,北京,100101 4. 内蒙古自治区离子束生物工程重点实验室,内蒙古,呼和浩特,010021 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 |
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摘 要: | 以黑曲霉(Aspergillus niger)A3的基因组DNA为模板,根据已报道的xynB基因序列设计简并引物,在合适的PCR反应条件下有效地扩增出了xynB的结构基因及其5'调控区序列片段,并克隆到pBS-T载体上,序列测定表明,该目的片段全长1 611 bp.通过序列分析:结构基因部分长744 bp,其中含有一个66 bp的内含子和18个氨基酸的信号肽序列;xynB基因的cDNA序列大小为678 bp,编码225个氨基酸,与GenBank上检索的木聚糖酶基因的核苷酸序列同源性最高达98%,氨基酸序列同源性达99%.在翻译起始点上游92 bp和118 bp处找到转录起始位点和类"TATA"box的核心启动子区特征元件以及"CAAT"box,表明所克隆的调控区序列具有真核生物启动子特点,这为构建木聚糖酶高效表达载体,用于工业育种奠定了基础.
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关 键 词: | 黑曲霉 木聚糖酶 基因克隆 序列分析 |
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