| 僵蚕碱溶性蛋白质的提取工艺优化及指纹图谱分析 |
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| 引用本文： | 朱锐灵,黄佳滢,刘莹,徐悦,张林松,闻崇炜.僵蚕碱溶性蛋白质的提取工艺优化及指纹图谱分析[J].江苏农业科学,2021,49(3):170-175. |
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| 作者姓名： | 朱锐灵 黄佳滢 刘莹 徐悦 张林松 闻崇炜 |
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| 作者单位： | 江苏大学药学院,江苏镇江212013;江苏大学药学院,江苏镇江212013;江苏省镇江市食品药品监督检验中心,江苏镇江212050;江苏大学药学院,江苏镇江212013;江苏省镇江市食品药品监督检验中心,江苏镇江212050;江苏大学药学院,江苏镇江212013 |
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| 基金项目： | 安徽省高等学校自然科学研究重大项目;江苏省镇江市重点研发计划(社会发展)项目;亳州学院院内科研项目;大学生实践创新训练计划 |
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| 摘 要： | 建立稀碱法提取僵蚕蛋白质的最佳工艺,并对其进行相应SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)指纹图谱分析.单因素考察缓冲液pH值、液料比、提取时间和提取温度对僵蚕碱溶性蛋白质提取率的影响,随后以Box-Behnken组合设计响应面优化,对试验结果进行回归拟合分析,获得上述因素对碱溶性蛋白质提取率的量化关系,确定最佳提取条件,并对提取的碱溶性蛋白质进行SDS-PAGE指纹图谱分析.结果表明最佳提取工艺条件为:Tris-HCl(三羟甲基氨基甲烷盐酸盐)缓冲液pH值8.0、液料比58 mL:1 g,提取温度为40℃,提取时间为205 min,此时碱溶性蛋白质提取率可达2.29％.SDS-PAGE指纹图谱结果表明僵蚕碱溶性蛋白质含有29.85、27.28 ku 2条迁移率相近的高丰度特征性条带,分别占总蛋白量的36.37％、32.65％,同时还有78.8、69 ku较高丰度特征性条带,该指纹图谱具有种属特异性.本研究建立了僵蚕碱溶性蛋白质的最佳提取工艺条件,所得SDS-PAGE指纹图谱可为僵蚕药材的分子鉴定提供参考依据.
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| 关 键 词： | 僵蚕 碱溶性蛋白质 响应面 提取工艺 指纹图谱 |
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