| 蚜虫蛋白质组双向电泳体系条件优化 |
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| 引用本文： | 武丽娟,樊永亮,宋月,张战凤,刘小凤,刘同先. 蚜虫蛋白质组双向电泳体系条件优化[J]. 植物保护学报, 2014, 41(6): 649-656 |
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| 作者姓名： | 武丽娟 樊永亮 宋月 张战凤 刘小凤 刘同先 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学, 西北旱区作物逆境生物学国家重点实验室, 农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室, 陕西 杨凌 712100;西北农林科技大学, 西北旱区作物逆境生物学国家重点实验室, 农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室, 陕西 杨凌 712100;西北农林科技大学, 西北旱区作物逆境生物学国家重点实验室, 农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室, 陕西 杨凌 712100;西北农林科技大学, 西北旱区作物逆境生物学国家重点实验室, 农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室, 陕西 杨凌 712100;西北农林科技大学, 西北旱区作物逆境生物学国家重点实验室, 农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室, 陕西 杨凌 712100;西北农林科技大学, 西北旱区作物逆境生物学国家重点实验室, 农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室, 陕西 杨凌 712100 |
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| 基金项目： | 国家公益性行业(农业)科研专项(20133019),西北农林科技大学2013年校级大型仪器设备新功能开发项目 |
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| 摘 要： | 为优化有效分离蚜虫全蛋白的双向电泳体系,以豌豆蚜Acyrthosiphon pisum (Harris)为材料,比较了不同蛋白提取方法(裂解液提取法、三氯乙酸/丙酮沉淀法、饱和酚抽提法)、蛋白上样量、IPG胶条pH梯度等条件对蚜虫全蛋白双向电泳的影响。结果表明:不同的蛋白提取方法所获得的豌豆蚜全蛋白提取率有显著差异,其中以饱和酚抽提法的提取率最高,为5.34±0.26 mg/g,且所提取的蛋白种类丰富度也优于其它2种方法;当蛋白上样量为100 μg时所得蛋白点为1 793±36个,高于其它上样量;相同条件下选用11 cm pH 3~10非线性IPG胶条时所得蛋白点为1 803±42个,优于pH 4~7的IPG胶条。表明采用饱和酚抽提法进行提取蛋白,选用11 cm pH 3~10非线性IPG胶条,以蛋白银染方法、分离胶浓度为12.5%进行双向电泳时最适蛋白上样量为100 μg,所得可识别蛋白质点最高,且重复性试验匹配率高,可用于豌豆蚜蛋白质组学研究。
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| 关 键 词： | 蚜虫 蛋白质组 双向电泳 条件优化 |
| 收稿时间： | 2014-10-11 |
Optimization of two-dimensional gel electrophoresis technology system for aphid proteome |
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| Wu Lijuan,Fan Yongliang,Song Yue,Zhang Zhanfeng,Liu Xiaofeng and Liu Tongxian. Optimization of two-dimensional gel electrophoresis technology system for aphid proteome[J]. Acta Phytophylacica Sinica, 2014, 41(6): 649-656 |
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| Authors: | Wu Lijuan Fan Yongliang Song Yue Zhang Zhanfeng Liu Xiaofeng Liu Tongxian |
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| Affiliation: | State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas, Northwest A & F University; Key Laboratory of Northwest Loess Plateau Crop Pest Management, Ministry of Agriculture, Yangling 712100, Shaanxi Province, China;State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas, Northwest A & F University; Key Laboratory of Northwest Loess Plateau Crop Pest Management, Ministry of Agriculture, Yangling 712100, Shaanxi Province, China;State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas, Northwest A & F University; Key Laboratory of Northwest Loess Plateau Crop Pest Management, Ministry of Agriculture, Yangling 712100, Shaanxi Province, China;State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas, Northwest A & F University; Key Laboratory of Northwest Loess Plateau Crop Pest Management, Ministry of Agriculture, Yangling 712100, Shaanxi Province, China;State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas, Northwest A & F University; Key Laboratory of Northwest Loess Plateau Crop Pest Management, Ministry of Agriculture, Yangling 712100, Shaanxi Province, China;State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas, Northwest A & F University; Key Laboratory of Northwest Loess Plateau Crop Pest Management, Ministry of Agriculture, Yangling 712100, Shaanxi Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | aphid proteomics two-dimensional electrophoresis condition optimization |
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