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小麦叶绿体果糖 1, 6 二磷酸醛缩酶活性的测定方法及应用
引用本文:吕 科,刘富兵,花 庆,张兆龙,郭蔼光,徐 虹. 小麦叶绿体果糖 1, 6 二磷酸醛缩酶活性的测定方法及应用[J]. 麦类作物学报, 2011, 31(1): 82-87
作者姓名:吕 科  刘富兵  花 庆  张兆龙  郭蔼光  徐 虹
作者单位:西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌,712100
基金项目:教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NECT070703);国家自然科学基金项目(30971769)。
摘    要:高等植物中的果糖1,6二磷酸醛缩酶(FBA)在叶肉细胞的叶绿体中高效表达,可逆催化卡尔文循环中果糖1, 6 二磷酸(FBP)和景天庚酮糖1, 7二磷酸(SuBP)的合成反应,在各种非生物胁迫的逆境条件下,FBA会表现出不同的响应。为了测定小麦叶绿体FBA (CpFBA)的活性,进一步研究小麦中CpFBA的功能,本研究比较了两种酶活性测定方法:一种方法是根据FBA催化FBP分解的过程中NADH转化为NAD+的量来确定FBA的活性;另一种是利用谢利万诺夫试剂(Sediwanoff reagent)与酮糖FBP作用生成鲜红色复合物,根据OD520的变化测定FBA的活性。在此基础上,测定了两个小麦材料在4℃低温处理过程中CpFBA活性的变化。结果表明,谢利万诺夫试剂法对于测定小麦叶绿体FBA活性较为可行。CpFBA酶活性受到温度的影响,随着处理时间的延长,在35 d内两个材料的FBA酶活都呈现升高降低升高的交替变化,相比较而言,对低温不敏感的小麦矮变1号相对稳定,对低温敏感的返白系小麦出现先升高后又逐渐降低的趋势。

关 键 词:小麦;叶绿体; 果糖1  6二磷酸醛缩酶;酶活性测定;NADH;谢利万诺夫试剂法

The Methods for Measuring the Activity of Chloroplast Fructose 1, 6 bisphosphate Aldolase in Common Wheat and Its Application
LV Ke,LIU Fu bing,HUA Qing,ZHANG Zhao long,GUO Ai guang,XU Hong. The Methods for Measuring the Activity of Chloroplast Fructose 1, 6 bisphosphate Aldolase in Common Wheat and Its Application[J]. Journal of Triticeae Crops, 2011, 31(1): 82-87
Authors:LV Ke  LIU Fu bing  HUA Qing  ZHANG Zhao long  GUO Ai guang  XU Hong
Abstract:
Keywords:Wheat   Fructose 1,6 bisphosphate aldolase   Enzyme activity testing   NADH   Sediwanoff reagent
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