马立克氏病病毒gB基因的克隆及理组鸡痘病毒的构建 |
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引用本文: | 丁巧玲,陈溥言.马立克氏病病毒gB基因的克隆及理组鸡痘病毒的构建[J].中国兽医科技,2002,32(5):3-5. |
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作者姓名: | 丁巧玲 陈溥言 |
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摘 要: | 通过PCR方法扩增了马立克氏病病毒(MDV)2.8kbgB基因,并且在其两端加上PstⅠ和NotⅠ位点。然后用PstⅠ/NotⅠ酶切回收gB片段,插入到转移载体pEFgpt12s复合启动子Spromoter的下游的PstⅠ/NotⅠ酶切位点处,构建了转移质粒pEFgpt12s-gB。将该质粒与鸡痘病毒(FPV)野毒282E4株共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过MXHAT选择培养基进行筛选,蚀斑纯化,经PCR扩增证实重组病毒中含有gB基因。重组病毒和FPV野毒在CEF上形成空斑大小无明显差别,病毒效价分别为10^-5.43TCDID50/mL和10^-6TCID50/mL,表明外源基因的插入不影响所构建的重组病毒的生物学特性。
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关 键 词: | 马立克氏病病毒 糖蛋白B抗原 重组鸡痘病毒 基因克隆 马立克氏病 基因工程疫苗 |
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