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小麦AGPase胞质型基因LSUⅠ的克隆及正义、反义与RNAi干扰载体的构建
引用本文:康国章,张孟琴,官春云,郭天财,朱云集. 小麦AGPase胞质型基因LSUⅠ的克隆及正义、反义与RNAi干扰载体的构建[J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 2007, 33(6): 607-615
作者姓名:康国章  张孟琴  官春云  郭天财  朱云集
作者单位:1. 河南农业大学,国家小麦工程技术研究中心,河南,郑州,450002
2. 河南科技大学,林业职业学院,河南,洛阳,471002
3. 河南农业大学,国家小麦工程技术研究中心,河南,郑州,450002;湖南农业大学,农学院,湖南,长沙,461012
基金项目:中国博士后科学基金(第三十九批);河南省教育厅自然科学基金
摘    要:采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号的发育籽粒中克隆出AGPase胞质型大亚基基因(large subunit,LSUⅠ)的cDNA全长(1947 bp,GenBank No.DQ839506),同源性比较结果表明,与GenBank上已报道的LSUⅠ基因同源性达99%,虽与其有2处碱基不同(与Z21969相比,分别在851 bp处的T变为C和926 bp处的G变为A),但他们的氨基酸序列相同,故不影响其功能.以pBI121质粒为基础,通过中间载体pBSK,构建了由35S启动子调控的LSUⅠ基因的正义表达载体pBI121LSU Ⅰ S;将该基因反向置于pBI121质粒的CaMV35S启动子之后,构建了LSUⅠ的反义表达载体pBI121LSU Ⅰ A.同时还克隆出LSUⅠ基因的250 bp片段,以pFGC5941质粒为基础,构建了RNAi干扰载体pFGCLsuⅠ,这为研究该基因的功能打下了很好的基础.

关 键 词:普通小麦  AGPase胞质型大亚基  表达载体
文章编号:1008-9209(2007)06-0607-09
收稿时间:2007-01-09
修稿时间:2007-01-09

Molecular cloning of AGPase large subunit Ⅰ gene and construction of its sense, antisense and RNAi expression vectors
KANG Guo-zhang,ZHANG Meng-qin,GUAN Chun-yun,GUO Tian-cai,ZHU Yun-ji. Molecular cloning of AGPase large subunit Ⅰ gene and construction of its sense, antisense and RNAi expression vectors[J]. Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences), 2007, 33(6): 607-615
Authors:KANG Guo-zhang  ZHANG Meng-qin  GUAN Chun-yun  GUO Tian-cai  ZHU Yun-ji
Abstract:
Keywords:
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